Verfügbarkeit: Durchflusszytometrie als schnelle Detektionsmethode für Bakterien

Durchflusszytometrie als schnelle Detektionsmethode für Bakterien: Abschlussbericht (DVGW-Förderkennzeichen W 201703)

Gespeichert in:

Bibliographische Detailangaben
Weitere beteiligte Personen:	Ho, Johannes (MitwirkendeR), Nocker, Andreas (MitwirkendeR), Bendinger, Bernd (MitwirkendeR), West, Stephanie (MitwirkendeR), Tiehm, Andreas (MitwirkendeR)
Format:	Buch
Sprache:	Deutsch
Veröffentlicht:	Karlsruhe TZW Oktober 2020
Schriftenreihe:	Veröffentlichungen aus dem Technologiezentrum Wasser Karlsruhe 94
Schlagwörter:	Detektion Bakterien Wassergüte Lasermesstechnik Durchflusscytometrie Wasserprobe Trinkwasserversorgung Forschungsbericht
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Datensatz im Suchindex

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adam_text	INHALTSVERZEICHNIS INHALTSVERZEICHNIS ........................................................................................................................ I 1 EINLEITUNG UND PROJEKTZIELE ................................................................................................. 3 1.1 EINLEITUNG ........................................................................................................................ 3 1.2 PROJEKT FLOWDETECT .......................................................................................................... 4 1.3 PROJEKTZIELE ...................................................................................................................... 4 2 THEORETISCHE GRUNDLAGEN ................................................................................................... 6 2.1 TRINKWASSERHYGIENE ....................................................................................................... 6 2.2 DURCHFLUSSZYTOMETRIE ...................................................................................................... 6 2.2.1 MIKROBIOLOGISCHE NACHWEISVERFAHREN .................................................................... 6 2.2.2 PRINZIP DER DURCHFLUSSZYTOMETRIE ........................................................................... 7 2.2.3 FACS - FLUORESZENZ-AKTIVIERTE ZELLSORTIERUNG .................................................... 13 3 VERGLEICH VON DURCHFLUSSZYTOMETRIE MIT ANDEREN MIKROBIOLOGISCHEN VERFAHREN. ..14 3.1 MIKROSKOPISCHE GESAMTZELLZAHL ................................................................................... 14 3.2 KULTURVERFAHREN: LABORKULTUREN .................................................................................... 15 3.3 KULTURVERFAHREN: UMWELTPROBEN ................................................................................... 15 3.4 FAZIT ............................................................................................................................... 17 4 CHARAKTERISIERUNG VON HNA UND LNA SIGNALEN ........................................................... 18 4.1 GRUNDLAGEN UND FRAGESTELLUNG .................................................................................... 18 4.2 MIKROSKOPIE VON HNA UND LNA ZELLEN ....................................................................... 20 4.3 KULTIVIERUNG VON HNA UND LNA ZELLEN ........................................................................ 21 4.4 KORRELATION DER MESSPARAMETER .................................................................................. 22 4.5 ANWENDUNGSBEISPIELE ................................................................................................. 24 4.5.1 WACHSTUM EINER PROBE BEI LAGERUNG IM KUEHLSCHRANK ........................................ 24 4.5.2 STAGNATIONSEFFEKTE IM WASSERHAHN ..................................................................... 24 4.5.3 FILTRATION VON MINERALWASSER ................................................................................ 25 4.6 FAZIT .............................................................................................................................. 27 5 LEBEND/TOT-DIFFERENZIERUNG .............................................................................................. 28 5.1 LEBEND/TOT-DIFFERENZIERUNG IN DER DURCHFLUSSZYTOMETRIE ........................................... 28 5.2 OZON ............................................................................................................................. 31 5.2.1 EINLEITUNG .............................................................................................................. 31 5.2.2 WIRKUNG VERSCHIEDENER OZONKONZENTRATIONEN .................................................... 32 5.2.3 ZEITLICHE WIRKUNG VON OZON ................................................................................. 35 5.2.4 EINFLUSS VON OZON AUF SSC UND FSC ................................................................. 35 5.2.5 FAZIT ....................................................................................................................... 38 5.3 CHLOR ............................................................................................................................. 38 5.3.1 EINLEITUNG .............................................................................................................. 38 5.3.2 EINFLUSS DES PH-WERTES AUF DIE LEBEND/TOT-DIFFERENZIERUNG ............................... 39 5.3.3 FAZIT ....................................................................................................................... 43 5.4 UV-STRAHLUNG ................................................................................................................ 44 5.4.1 EINLEITUNG .............................................................................................................. 44 5.4.2 ETABLIERUNG NEUER FARBSTOFFE ............................................................................... 45 5.4.3 VARIABLEN DER PROTOKOLLE ....................................................................................... 45 II 5.4.4 DIBAC ..................................................................................................................... 46 5.4.5 CFDA UND CFDA-SE ............................................................................................ 50 5.4.6 CTC ....................................................................................................................... 52 5.4.7 2-NBDG ................................................................................................................. 54 5.4.8 FAZIT ....................................................................................................................... 56 5.5 ERGEBNISUEBERSICHT UND FAZIT ......................................................................................... 57 6 SPEZIFISCHE DETEKTION ....................................................................................................... 59 6.1 EINLEITUNG - WARUM EINE SPEZIFISCHE DETEKTION? ....................................................... 59 6.2 AUSWAHL DER SONDEN .................................................................................................... 60 6.3 ETABLIERUNG VON FLOW-FISH PROTOKOLLEN ....................................................................... 60 6.3.1 KONVENTIONELLE FLOW-FISH .................................................................................... 60 6.3.2 KOMPETITIVE FLOW-FISH ......................................................................................... 64 6.3.3 METHODENOPTIMIERUNG ........................................................................................... 68 6.4 ANWENDUNG BEI WASSERPROBEN ................................................................................... 74 6.5 ZUSAMMENFASSUNG UND FAZIT ...................................................................................... 76 7 ANWENDUNGSBEISPIELE ZUM MONITORING IN AUFBEREITUNG UND VERTEILUNG .................. 77 7.1 TRINKWASSERVERSORGUNG MAGDEBURG ........................................................................... 77 7.2 PROZESSKONTROLLE AM BEISPIEL VON TRINKWASSERAUFBEREITUNGSANLAGEN UND EINER FERNWASSERLEITUNG ........................................................................................................... 80 7.2.1 UNTERSUCHTE AUFBEREITUNGSANLAGEN UND FERNWASSERLEITUNG .............................. 80 7.2.1.1 AUFBEREITUNGSPROZESS IM WASSERWERK GRANETALSPERRE .............................. 80 7.2.1.2 VERTEILUNG DES TRINKWASSERS UEBER FERNWASSERLEITUNG ............................... 81 7.2.1.3 AUFBEREITUNGSPROZESS IM WASSERWERK RAMLINGEN ...................................... 83 7.2.1.4 UNTERSUCHUNGSPARAMETER ............................................................................. 83 7.2.2 ERGEBNISSE DER AUFBEREITUNG IM WW GRANETALSPERRE UND DER FWL GRANE-OST .. 84 7.2.3 ERGEBNISSE DER AUFBEREITUNG IM WW RAMLINGEN ................................................. 91 7.2.4 ZUSAMMENFASSUNG UND FAZIT .............................................................................. 97 8 VERSUCHE ZUR STANDARDISIERUNG ....................................................................................... 98 8.1 EINLEITUNG ...................................................................................................................... 98 8.2 PROBENAHMEGEFAESSE: KUNSTSTOFF UND GLAS ................................................................... 98 8.3 LAGERUNG DER PROBEN ................................................................................................... 99 8.4 FAERBEPROTOKOLL ............................................................................................................ 101 8.4.1 EINFLUSS DER INKUBATIONSZEIT ................................................................................. 101 8.4.2 EINFLUSS DER ZEIT BIS ZUR MESSUNG ...................................................................... 105 8.4.3 VERSCHLEPPUNG VON ZELLEN (WASCHSCHRITTE) ...................................................... 110 8.4.4 EINFLUSS VON FARBSTOFFEN UND LOESUNGSMITTELN ................................................... 111 8.5 GATING ......................................................................................................................... 116 8.5.1 ALLGEMEINES UEBER DAS GATING ............................................................................. 116 8.5.2 TCC ..................................................................................................................... 116 8.5.3 HNA UND LNA ..................................................................................................... 120 8.5.4 ICC ....................................................................................................................... 122 8.6 EINFLUSS VON STOERSTOFFEN .............................................................................................. 123 8.7 FAZIT ........................................................................................................................... 128 9 RINGVERSUCHE ................................................................................................................. 129 9.1.1 UEBERSICHT .............................................................................................................. 129 9.1.2 VORGEHENSWEISE .................................................................................................. 129 9.1.3 METHODE ZUM VERGLEICH DER MESSWERTE ........................................................... 130 9.1.4 INDIVIDUELLE UND EINHEITLICHE AUSWERTUNG ............................................................ 130 9.1.5 ABWEICHUNG DER REPLIKATE .................................................................................. 130 9.1.6 ERGEBNISUEBERSICHT ............................................................................................... 132 9.1.7 DETAILS ZU RINGVERSUCH 1 ..................................................................................... 133 9.1.8 DETAILS ZU RINGVERSUCH II .................................................................................... 138 9.1.9 DETAILS ZU RINGVERSUCH III ................................................................................... 143 9.1.10 FAZIT DER RINGVERSUCHE ...................................................................................... 147 10 SOPS ............................................................................................................................... 148 10.1 EINLEITUNG .................................................................................................................... 148 10.2 KURZ-SOP AUF EINER SEITE .......................................................................................... 148 10.3 DETAILLIERTES SOP ........................................................................................................ 149 10.3.1 PROBENAHME UND LAGERUNG ................................................................................ 149 10.3.2 VORBEHANDLUNG DER PROBEN ................................................................................. 149 10.3.3 ZUSAETZLICHE KONTROLLEN ......................................................................................... 150 10.3.4 FAERBUNG DER PROBEN ............................................................................................. 151 10.3.5 MESSUNG IM DURCHFLUSSZYTOMETER ...................................................................... 152 10.3.6 AUSWERTUNG DER DATEN UND GATING .................................................................... 155 10.4 TIPPS FUER UNERFAHRENE NUTZER .................................................................................... 158 11 VERFUEGBARE GERAETE ........................................................................................................ 159 12 SCHLUSSFOLGERUNGEN UND AUSBLICK ........................................................................... 160 12.1 ZUSAMMENFASSENDES FAZIT ........................................................................................ 160 12.2 AUSBLICK ....................................................................................................................... 161 13 DANKSAGUNG .................................................................................................................. 162 14 LITERATURVERZEICHNIS ...................................................... 163 15 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS .............................................................................................. 168 16 ABBILDUNGSVERZEICHNIS ................................................................................................ 169 17 TABELLENVERZEICHNIS ..................................................................................................... 178 III
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