Der Einfluss von fraktionierter Bestrahlung und AnnexinA5 auf Zelltod und immunogenes Potential der murinen kolorektalen Tumorzelllinie CT26:
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| adam_text | *DER EINFLUSS VON FRAKTIONIERTER BESTRAHLUNG UND ANNEXINAOE AUF
ZELLTOD UND IMMUNOGENES POTENTIAL DER MURINEN KOLOREKTALEN
TUMORZELLLINIE CT26
AUS DER STRAHLENKLINIK
DER FRIEDRICH-ALEXANDER UNIVERSITAET ERLANGEN-NUERNBERG
DIREKTOR: PROF. DR. MED. UNIV. R. FIETKAU
ZUR ERLANGUNG DES DOKTORGRADES DR. MED.
DER MEDIZINISCHEN FAKULTAET DER
FRIEDRICH-ALEXANDER UNIVERSITAET ERLANGEN-NUERNBERG
VORGELEGT VON
STEFANIE GABRIEL
AUS
ROSENHEIM
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INHALTSVERZEICHNIS
1 ZUSAMMENFASSUNG 1
1.1 DEUTSCH 1
1.2 ENGLISCH , 3
2 EINLEITUNG 5
2.1 KREBSENTSTEHUNG 5
2.2 KOLOREKTALES KARZINOM 8
2.3 THERAPIELEITLINIEN 10
2.3.1 OPERATION 10
2.3.2 CHEMOTHERAPIE 11
2.3.3 RADIOTHERAPIE 11
2.4 IMMUNTHERAPIE 12
2.5 ZELLTOD 13
2.5.1 APOPTOSE 13
2.5.2 NEKROSE 14
2.5.3 IMMUNOGENITAET APOPTOTISCHER UND NEKROTISCHER ZELLEN 16
HIGH-MOBILITY GROUP BOX 1 17
HITZESCHOCKPROTEIN 70 18
2.6 ANNEXINA5 ALS IMMUNSTIMULANS 19
2.7 ZIELSETZUNG 21
3 MATERIAL UND METHODEN 23
3.1 MATERIAL 23
3.1.1 ZELLLINIE UND VERSUCHSTIERE 23
3.1.2 GERAETE 23
3.1.3 VERBRAUCHSMATERIALIEN 24
3.1.4 CHEMIKALIEN UND REAGENZIEN 24
3.1.5 MEDIEN 26
3.1.6 ELISA KITS 26
3.1.7 ANTIKOERPER 26
3.2 METHODEN 27
3.2.1 ZELLKULTUR 27
3.2.2 RADIOTHERAPIE- BESTRAHLUNG DER ZELLEN 27
3.2.3 KOLONIEBILDUNGSTEST 28
3.2.4 BESTIMMUNG DES ZELLTODES 28
3.2.5 BESTIMMUNG DES ZELLZYKLUS 31
3.2.6 PROTEINBIOCHEMISCHE METHODEN 32
3.2.7 ELISA 36
3.2.8 MAUSVERSUCH 37
3.2.9 STATISTISCHE AUSWERTUNG 39
4 ERGEBNISSE 40
4.1 KOLONIEBILDUNGSTEST 40
4.2 CHARAKTERISIERUNG DES ZELLTODES NACH BESTRAHLUNG 41
4.2.1 ZELLTODESFORMEN 24 UND 48 STUNDEN NACH EINZELBESTRAHLUNG MIT
UNTERSCHIEDLICHEN DOSEN 42
4.2.2 ZELLTOD VON CT26 ZELLEN ZU KURZEN ZEITPUNKTEN NACH BESTRAHLUNG 44
4.2.3 ZELLTOD VON CT26 ZELLEN ZU SPAETEREN ZEITPUNKTEN NACH BESTRAHLUNG
46
4.2.4 ZELLTOD VON CT26 ZELLEN NACH FRAKTIONIERTE BESTRAHLUNG 47
4.3 ZELLZYKLUSPHASEN VON CT26 ZELLEN NACH EINZELBESTRAHLUNGEN 50
4.3.1 ZELLZYKLUSPHASEN 24 STUNDEN NACH BESTRAHLUNG 50
4.3.2 ZELLZYKLUSPHASEN 48 STUNDEN NACH BESTRAHLUNG 51
4.3.3 ZELLZYKLUSPHASEN VON CT26 ZELLEN ZU KURZEN ZEITPUNKTEN NACH
BESTRAHLUNG 52
4.4 FREIGESETZTE GEFAHRENSIGNALE NACH FRAKTIONIERTER BESTRAHLUNG 55
4.4.1 DETEKTION VON HMGB1 UND HSP70 DURCH WESTERNBLOT IM UEBERSTAND
BESTRAHLTER ZELLEN 55
4.4.2 DETEKTION VON HMGB1 UND HSP70 DURCH ELISA IM UEBERSTAND
BESTRAHLTER ZELLEN 56
4.5 TESTUNG DER KLONOGENITAET UND DES IMMUNOGENEN POTENTIALS VON
CT26 ZELLEN NACH BESTRAHLUNG IM TIERVERSUCH 58
4.5.1 WACHSTUMSVERHALTEN VON CT26 ZELLEN IN VIVO 59
4.5.2 UEBERLEBENSVORTEILE DER MAEUSE NACH INJEKTION VON BESTRAHLTEN
TUMORZELLEN (+/-AXA5) 61
4.5.3 BESTIMMUNG DES TUMORSPEZIFISCHEN IMMUNGLOBULIN G IM SERUM
IMMUNISIERTER MAEUSE 63
5 DISKUSSION 67
5.1 KOLONIEBILDUNGSTEST 68
5.2 ANALYSE DES ZELLTODES NACH BESTRAHLUNG 68
5.3 ANALYSE DER ZELLZYKLUSPHASEN NACH BESTRAHLUNG 71
5.4 FREISETZUNG VON GEFAHRENSIGNALEN NACH BESTRAHLUNG 72
5.4.1 FREISETZUNG VON HMGB1 72
5.4.2 FREISETZUNG VON HSP70 72
5.5 TIERVERSUCH 73
5.5.1 WACHSTUMSVERHALTEN DER BESTRAHLTEN ZELLEN 73
5.5.2 KEINE UEBERLEBENSNACHTEILE DER MIT AXA5 BEHANDELTEN GRUPPEN 75
5.5.3 BESTIMMUNG DES TUMORSPEZIFISCHEN IGG GESAMTSPIEGELS
IMMUNISIERTER MAEUSE 75
6 LITERATURVERZEICHNIS 78
7 ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 86
8 ABBILDUNGSVERZEICHNIS 90
9 TABELLENVERZEICHNIS 91
10 DANKSAGUNG 92
11 LEBENSLAUF 93
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