Zeitliche Expressionsprofile der Zytokine Interleukin-1 beta, Interleukin-6 und Transforming Growth Factor-beta 1 mittels real-time Polymerase Kettenreaktion (rt-PCR) im Myelonkompressionsmodell der Ratte:
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Aachen
Mainz
2007
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1. Zusammenfassung 3
1.1. Abkürzungen 5
2. Einleitung 7
2.1. Hintergrund und klinische Bedeutung 7
2.2. Experimentelle Paraplegiologie 7
3. Stand der Forschung 9
3.1. Erfolgreiche Regeneration im PNS 9
3.2. Unzureichende Regeneration im ZNS 11
3.3. Posttraumatische Reaktionen im Bereich einer Rückenmarksläsion 13
3.4. Bisherige experimentelle Therapieansätze nach Rückenmarkstraumen 18
3.4.1. Applikation neurotropher Substanzen 18
3.4.2. Unterdrückung regenerationshemmender Faktoren 20
3.4.3. Transplantation von peripherem Nervengewebe und Gliazellen des
N. olfactorius 22
3.4.4. Stammzelltransplantation 23
3.4.5. Kombination verschiedener Therapiekonzepte 24
3.4.6. Schwierigkeiten der Übertragung experimenteller Befunde
auf die klinische Anwendung 26
3.5. Zytokine 27
3.5.1. Interleukin-1 beta (IL-lb) 28
3.5.2. Interleukin-6 (1L-6) 30
3.5.3. Transforming Growth Factor-beta 1 (TGF-bl) 34
3.6. Zielsetzung der hier dargestellten Untersuchungen 36
4. Material und Methoden 38
4.1. Versuchstiere 38
4.2. Operation und Gewebeaufbereitung 38
4.2.1. Myelonkompressionsmodell 38
4.2.2. Gewebsentnahme 40
t
4.3. Molekulargenetische Weiterverarbeitung des Gewebes 41
4.3.1. RNA-Isolation 42
4.3.2. DNAse Verdau 42
4.3.3. cDNA Synthese 43
4.3.4. Polymerase Kettenreaktion (PCR) zur Überprüfung der cDNA-Synthese
und Detektion der RNA der hier untersuchten Zytokine 43
4.3.5. Real-time Polymerase Kettenreaktion (rt-PCR) 47
4.4. Standardisierung und statistische Bearbeitung der Messwerte 54
5. Ergebnisse 57
5.1. Cyclophilin-Expression 57
5.2. Interleukin-1 beta-Expression 60
5.3. Interleukin-6-Expression 65
5.4. Transforming Growth Factor-beta 1-Expression 69
6. Diskussion 75
7. Literaturverzeichnis 86
8. Lebenslauf 103
9. Danksagung 105
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