Verfügbarkeit: Untersuchungen zur Epidemiologie der Equinen Babesiose in Brasilien

Untersuchungen zur Epidemiologie der Equinen Babesiose in Brasilien:

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Bibliographische Detailangaben
Beteilige Person:	Heim, Alexandra (VerfasserIn)
Format:	Buch
Sprache:	Deutsch
Veröffentlicht:	Giessen VVB Laufersweiler 2008
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adam_text	AUS DEM INSTITUT FUER VERGLEICHENDE TROPENMEDIZIN UND PARASITOLOGIE DER TIERAERZTLICHEN FAKULTAET DER LUDWIG-MAXIMILIANS-UNIVERSITAET MUENCHEN VORSTAND: PROF. DR. KURT PFISTER UND DEM DEPARTAMENTO DE MEDICINA VETERINAERIA PREVENTIVA, UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS GERAIS, BRASILIEN VORSTAND: PROF. DR. LYGIA M. FRICHE-PASSOS ARBEIT UNTER LEITUNG VON DR. JOERG HIRZMANN UNTERSUCHUNGEN ZUR EPIDEMIOLOGIE DER EQUINEN BABESIOSE IN BRASILIEN INAUGURAL-DISSERTATION ZUR ERLANGUNG DES AKADEMISCHEN GRADES EINES DOKTORS DER VETERINAERMEDIZIN DER LUDWIG-MAXIMILIANS-UNIVERSITAET MUENCHEN (DR. MED. VET.) VORGELEGT DER TIERAERZTLICHEN FAKULTAET DER LUDWIG-MAXIMILIANS-UNIVERSITAET IN MUENCHEN VON ALEXANDRA HEIM GEBOREN IN VILLINGEN MUENCHEN 2007 INHALTSVERZEICHNIS INHALTSVERZEICHNIS: 1 EINLEITUNG UND PROBLEMSTELLUNG 9 2 LITERATURUEBERSICHT 10 2.1 TAXONOMIE DER EQUINEN PIROPLASMEN 10 2.2 ENTWICKLUNGSZYKLUS 11 2.3 VORKOMMEN DER ZECKEN IN BRASILIEN 13 2.3.1 TAXONOMISCHE EINTEILUNG DER SCHILDZECKEN 13 2.3.2 WICHTIGSTE ZECKEN ALS VEKTOREN FUER THEILERIA EQUI UND BABESIA CABALLI 13 2.3.2.1 AMBLYOMMA CAJENNENSE 13 2.3.2.2 BOOPHILUS MICROPLUS 14 2.3.2.3 ANOCENTOR NITENS 15 2.4 BABESIEN UND THEILERIEN BEIM PFERD 16 2.4.1 VORKOMMEN 16 2.4.2 B. CABALLI 16 2.4.3 T.EQUI 17 2.4.4 B. CABALLI UND T. EQUI BEIM FOETUS 17 2.5 KRANKHEITSSYMPTOME 17 2.6 DIAGNOSE 18 2.6.1 DIREKTER NACHWEIS 18 2.6.1.1 BLUTAUSSTRICH 18 2.6.1.2 POLYMERASE-KETTENREAKTION (PCR) 19 2.6.1.3 LOOP-MEDIATED ISOTHERMAL AMPLIFICATION (LAMP) 19 2.6.2 INDIREKTER NACHWEIS 19 2.6.2.1 INDIREKTER IMMUNFLUORESZENZANTIKOERPERTEST (IFAT) 19 2.6.2.2 ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY (ELISA) 20 2.6.2.3 DIE KOMPLEMENT-BINDUNGSREAKTION (KBR) 20 2.7 THERAPIEMASSNAHMEN UND PROPHYLAXE 20 2.8 BISHERIGE UNTERSUCHUNGEN ZUR BABESIOSE BEI PFERDEN IN BRASILIEN 20 3 MATERIAL UND METHODEN 22 3.1 HERKUNFTSORTE UND PROBENAUFBEREITUNG 22 3.2 VERWENDETE MATERIALIEN 23 3.3 MOLEKULARE ANALYSE 24 3.3.1 MESSUNG DER DNA KONZENTRATION MIT NANO-DROP 24 3.3.2 DIE POLYMERASEKETTENREAKTION (PCR) 24 3.3.2.1 PRINZIP DER POLYMERASEKETTENREAKTION 24 3.3.2.2 REAL-TIMEPCR , 25 3.3.2.3 MULTIPLEX REAL-TIME PCR ZUM NACHWEIS VON B. CABALLI UND T. EQUI BEIM PFERD 26 INHALTSVERZEICHNIS 3.3.3 KLONIERUNG UND AUFREINIGUNG VON T. EQUI UND B. CA/ A///-SPEZIFISCHEN DNA SEQUENZEN 27 3.3.3.1 AMPLIFIKATION 27 3.3.3.1.1 HERSTELLUNG KOMPETENTER ZELLEN 27 3.3.3.1.2 TRANSFORMATION DURCH HITZESCHOCK 28 3.3.3.1.3 HERSTELLUNG DES NAEHRBODENS 28 3.3.3.2 LIGATION 28 3.3.3.3 TRANSFORMATION 28 3.3.3.4 SELEKTION 29 3.3.3.4.1 PLASMID AUFREINIGUNG 30 3.3.4 SEQUENZIERUNG DER DNA 31 3.3.5 AGAROSEGEL-ELEKTROPHORESE 31 3.3.5.1 HINTERGRUND 31 3.3.5.2 DURCHFUEHRUNG 31 3.3.6 OPTIMIERUNG DER AUSWERTUNGSBEDINGUNGEN 32 3.3.6.1 REAL-TIME PCR ZUR BESTIMMUNG DER NACHWEISGRENZE UEBER DIE MOLEKUELANZAHL DER KLONE EMA 1 UND BC 48 32 3.3.6.2 REAL -TIME PCR ZUR BESTIMMUNG DER PFERDE-DNA 34 3.4 INDIREKTER IMMUNFLUORESZENZANTIKOERPERTEST 37 3.5 STATISTIK 37 4 ERGEBNISSE 38 4.1 PUBLIKATION 38 4.2 PRAEVALENZ VON T. EQUI UND B. CABALLI 45 4.2.1 POSITIVER BLUTAUSSTRICH UND HAEMATOKRIT 45 4.2.2 SEROPRAEVALENZ, PCR-PRAEVALENZ UND HAEMATOKRITWERT : 45 4.2.2.1 PCR PRAEVALENZ FUER T. EQUI BEI EINEM GERINGEN HAEMATOKRITWERT 45 4.2.2.2 PCR PRAEVALENZ FUER B. CABALLI BEI EINEM GERINGEN HAEMATOKRITWERT 46 4.3 MOLEKULARE DARSTELLUNG VON B. CABALLI UND T. EQUI 46 4.4 KONGENITALE UEBERTRAGUNG 46 4.5 ZECKENVORKOMMEN 46 5 ZUSAMMENFASSENDE DISKUSSION 49 5.1 PROBLEMDARSTELLUNG UND ZIELVORGABE 49 5.2 DISKUSSION 49 5.3 SCHLUSSFOLGERUNGEN 52 6 ZUSAMMENFASSUNG 53 7 SUMMARY 54 8 LITERATURVERZEICHNIS 55 INHALTSVERZEICHNIS 9 ABKUERZUNGEN 61 10 ANHANG 62 10.1 ANHANG: GESAMTTABELLE 62 10.2 ANHANG: VERWENDETE MATERIALIEN 75 10.2.1 KITS, OLIGONUKLEOTIDE, REAGENZIEN 75 10.2.2 ENZYM 76 10.2.3 LOESUNGEN UND PUFFER 76 10.2.3.1 LOESUNGEN UND PUFFER FUER DIE AGAROSEGEL-ELEKROPHORESE 76 10.2.3.2 LOESUNGEN UND PUFFER FUER DEN INDIREKTEN IMMUNFLUORESZENZ-ANTIKOERPERTEST 76 10.2.3.3 LOESUNGEN UND PUFFER FUER DIE KLONIERUNG 76 10.2.3.4 LOESUNG FUER DIE PLASMIDAUFREINIGUNG 76 10.3 ANHANG: PROBEN MIT UNZUREICHENDER DNA 77 10.4 ANHANG: HERKUNFTSDATEN DER SCHLACHTPFERDE 77 10.5 ANHANG: SEQUENZ VON T. EQUI MIT DEN PRIMERN DER KONVENTIONELLEN UND DER REAL - TIME PCR 78 10.6 ANHANG: SEQUENZ VON B. CABALLI MIT DEN PRIMERN DER KONVENTIONELLEN UND DER REAL - TIME PCR 79 10.7 ANHANG: EQUUS CABALLUS DNA , ENTNOMMEN DER GENOM DATENBANK DQ297656 MIT DEN PRIMERN DER REAL - TIME PCR 82 10.8 ANHANG: REGIONALER SEQUENZENVERGLEICH VON T. EQUI: 83 10.9 ANHANG: REGIONALER SEQUENZENVERGLEICH VON B. CABALLI 87 10.10 ANHANG: REAKTIONSANSATZ DER MULTIPLEX REAL-TIME PCR FUER B. CABALLI UND T. EQUI 89 10.11 ANHANG: REAKTIONSANSATZ DER KONVENTIONELLEN PCR FUER B.CABALLI UND T. EQUI$9 10.12 ANHANG: BERECHNUNG DER MOLEKUELANZAHL AM BEISPIEL DES *SUPERCOIL PLASMIDS VON T.EQUI 90 10.13 ANHANG: STATISTISCHE TABELLEN 91 10.13.1 POSITIVER BLUTAUSSTRICH UND HAEMATOKRIT 91 10.13.2 PCR PRAEVALENZ T. EQUI UND NIEDRIGER HAEMATOKRIT 91 10.13.3 PCR PRAEVALENZ FUER B. CABALLIBEI EINEM NIEDRIGEN HAEMATOKRITWERT 91 10.13.4 VORKOMMEN VON DOPPELINFEKTIONEN VON B. CABALLI UND T. EQUI I N DER REAL- TIME PCR 92 10.13.5 ZWEI STICHPROBEN T-TEST FUER T. EQUI 92 10.13.6 ZWEI STICHPROBEN T-TEST FUERSS. CABALLI 93 10.14 ANHANG: PROZENTUALES AUFKOMMEN DER ZECKEN BEZOGEN AUF DIE REGION 94 10.15 ANHANG: ZYKLENZAHL DER UEBER DIE REAL-TIME PCR POSITIVEN ERGEBNISSE 95 INHALTSVERZEICHNIS 11 DANKSAGUNG 99
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