Vakzination gegen klassische Schweinepest (KSP) mit einer Subunit-Vakzine: experimentelle Studie zur Transmission von Challengevirus
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| Sprache: | Deutsch |
| Veröffentlicht: |
Herdecke
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2000
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Autor: Ziegler, Ute
Jahr: 2000
Inhaltsverzeichnis
INHALTSVERZEICHNIS
Seite
1. Einleitung 1
2. Literaturübersicht 3
2.1. Erreger der KSP 3
2.2. Epizootiologischer Prozeß S
23. Verlaufsformen der Krankheit 6
2.4. Diaplazentare Infektion 9
2.4.1. Diaplazentare Infektion durch Vakzination 10
2.4.2. Diaplazentare Infektion durch Feldvirus 12
2.5. Bekämpfung der KSP unter besonderer Betrachtung 15
immunbiologischer Maßnahmen
2.5.1. Konventionelle Impfstoffe 15
2.5.2. Moderne Impfstoffe 21
3. Material und Methoden 26
3.1. Material 26
3.1.1. Zellen 26
3.1.2. Virusstämme 26
3.1.3. Antikörper und Konjugate 26
3.1.4. Puffer und Lösungen 26
3.1.4.1. Medien und Lösungen für die Zellkultur 26
3.1.4.2. Lösungen für die Gelelektrophorese 28
3.1.4.3. Sonstige Puffer und Lösungen 28
3.1.5. Reagenzien 29
3.1.5.1. Chemikalien und biologische Produkte 29
3.1.5.2. Kommerzielle Diagnostik-Kits 30
3.1.5.3. Enzyme 30
II Inhaltsverzeichnis
3.1.5.4. Proteine 30
3.1.5.5. Nukleinsäuren und Nukleotide 30
3.1.6. Versuchstiere 30
3.1.7. Vakzine 31
3.1.8. Challengevirus 32
3.1.9. Geräte und Laborhilfsmittel 32
3.1.10. Verbrauchsmaterialien 33
3.2. Methoden 34
3.2.1. Zellkultivierung 34
3.2.2. Nachweis des Virus der KSP 34
3.2.2.1. Virusanzucht und Virustitration 34
3.2.2.2. Materialgewinnung für Virus- / Antigen-Nachweis 35
3.2.2.2.1. Bufiy coat / Leukozyten 35
3.2.2.2.2. Nasensekret 36
3.2.2.2.3. Organe 36
3.2.2.3. Nachweismethoden 37
3.2.2.3.1. Indirekter Immunperoxidase-Test (IPLA) 37
3.2.2.3.2. Indirekter Immunfluoreszenz-Test (IIFT) 37
3.2.2.3.3. Antigen-ELISA 38
3.2.2.3.4. Polymerasekettenreaktion (PCR) 38
3.2.2.3.4.1. Isolierung von KSPV-RNA 38
3.2.2.3.4.2. RT-PCR 39
3.2.3. Blutbild 40
3.2.4. Serumgewinnung 40
3.2.5. Nachweis von Antikörpern gegen KSPV 40
3.2.5.1. Virusneutralisationstest (VNT) 40
3.2.5.2. Antikörper-ELISA 41
3.2.5.2.1. Anti-E2-ELISA 41
3.2.5.2.2. Anti-Eras-ELISA 42
3.2.6. Biostatistische Analyse 42
Inhaltsverzeichnis
4. Experimentelle Studien zur Transmission von Challengevirus 43
nach Vakzination mit der Subunit-Vakzine „Porcilis Pesti
4.1. Tierexperimente zur horizontalen Übertragung des Virus der KSP 43
4.1.1. Challengevirusausscheidung und -Übertragung von 43
vakzinierten Absatzferkeln auf empfängliche Kontakttiere
4.1.1.1. Versuchsdurchfuhrung 43
4.1.1.2. Ergebnisse und Diskussion 44
4.1.2. Antikörperentwicklung und Virusausscheidung bei 53
Absatzferkeln nach Applikation von Vakzinen mit
unterschiedlichen Inaktrvierungsmitteln
4.1.2.1. Versuchsdurchfuhrung 53
4.1.2.2. Ergebnisse und Diskussion 55
4.1.3. Virusausscheidung und -Übertragung bei vakzinierten 65
Absatzferkeln nach Impfung mit unterschiedlichen
Vakzinationsschemata
4.1.3.1. Versuchsdurchführung 65
4.1.3.2. Ergebnisse und Diskussion 67
4.2. Tierexperimente zur vertikalen Übertragung des Virus der KSP 87
4.2.1. Wirksamkeit der Subunit-Vakzine an tragenden Sauen 87
4.2.1.1. Versuchsdurchfuhrung 87
4.2.1.2. Ergebnisse und Diskussion 89
4.2.2. Transmission von Challengevirus bei vakzinierten Sauen 107
unterschiedlicher Trächtigkeitsstadien
4.2.2.1. Untan5uchunginderFrühträchtigkeit(45.d) 107
IV Inhaltsverzeichnis
4.2.2.1.1. Versuchsdurchführung 107
4.2.2.1.2. Ergebnisse und Diskussion 108
4.2.2.2. Untersuchung in der Mitte der Trächtigkeit (65. d) 114
4.2.2.2.1. Versuchsdurchfuhrung 114
4.2.2.2.2. Ergebnisse und Diskussion 115
4.2.2.3. Untersuchung in der Spätträchtigkeit (90. d) 122
4.2.2.3.1. Versuchsdurchfuhrung 122
4.2.2.3.2. Ergebnisse und Diskussion 123
4.2.3. Dynamik der maternalen Antikörper bei Ferkeln und 129
Bewertung der Dauer des Schutzes
4.2.3.1. Allgemeine Versuchsdurchfuhrung 129
4.2.3.2. Untersuchung bis zum Absetzen 129
4.2.3.3. Untersuchung bis zum Mastbeginn 133
4.2.3.4. Untersuchung bis zum Mastende 138
5. Zusammenfassende Diskussion
142
6. Zusammenfassung / Summary
149
7. Literaturverzeichnis
157
8. Anhang (1 bis 5)
187
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