Monitoring von umwelt- und arbeitsbedingten Expositionen mit Hilfe von Biomarkern der Gesundheitsgefährdung, Sensitivität und Suszeptibilität:
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Aachen
Shaker
2000
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Beschreibung: | Zugl.: Bremen, Univ., Diss., 2000 |
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adam_text | Inhaltsverzeichnis
1 einleitung. 1
1.1 Modell der Krebsentstehuno 2
1.2 Fragestellung der vorliegenden Arbeit 3
1.3 biomarker 5
1.4 Chromosomenaberrationen 6
1.4.1 Chromosomenaberrationen als Biomarker der Strahlenexposition (Biologische
Strahlendosimetrie) 6
1.4.2 Evidenz chemischer Claslogenese in belasteten Kollektiven 10
1.4.3 Mechanismen der Induktion struktureller Chromosomenaberrationen 11
1.5 Individuelle SENsmvrrÄT und Suszeptibilitat 12
1.5.1 Biomarker der SensitMtät und Suszeptibilitat. 12
1.5.2 Genetisch bedingte Suszeptibililät. 13
1.5.3 Erworbene Suszeptibilitat IS
1.5.4 Untersuchung der DNA Reparaturfähigkeit mit dem Chatlenge Assay 19
1.6 UNTERSUCHTE NOXEN 19
1.6.1 Ionisierende Strahlung. 19
1.6.2 Cadmium 21
1.6.3 Styrol 26
1 MATERIAL UND METHODEN 29
2.1 Untersuchte Probanden 29
2.1.1 Tschernobyl Liquidatoren 29
2.1.2 Anwohner des Kernkraftwerks Krümmet. 29
2.1.3 Inkubation von Lymphozyten einer Probandin mit Cadmiumchlorid. 29
2.1.4 Styrolexponierte Bootsbauer 30
2.1.5 Kontrollgruppe nicht styrolexponierter Arbeitnehmer 32
2.2 LymphozytenkulturundMetaphasenpraparation 33
2.3 fluoreszenz w äm/ hybridisierung(fish) 33
2.3.1 Sondenherstellung. 33
2.3.2 Auswertung der Präparate 34
2.4 Challenge assay 34
3 ergebnisse.........................................................................—. .—.•—¦———••—————.—¦...3
3.1 Chromosomenaberrationsanalyse mit FISH 38
3.1.1 Sondenherstellung. 38
3.1.2 Zytogenetische Untersuchung von Tschernobyl Liquidatoren (INTAS Projekt) 41
3.1.3 Zytogenetische Untersuchung von Probanden aus der Eibmarsch 42
3.1.4 In vitro Studie mit cadmiumexpomerten Lymphozyten 44
3.1.5 Cytogenetische Untersuchung von styrolexponierten Bootsbauern 45
3.1.6 Untersuchung einer nicht styrolexponierten Kontrollgruppe von fimfArbeitnehmern in
einer überbetrieblichen Ausbildungsstätte in Bremerhaven 48
3.2 CHALLENOEASSAY 49
3.2.1 In vitro Studie mit cadmtumexponiertenLymphozyten 49
3.2.2 Untersuchung von styrolexponierten Bootsbauern 52
3.3 ValiditAt der Chromosomenaberrationsanalyse 69
4 diskussion 73
4.1 Chromosomenaberrationsanalyse MrrFISH 73
4.1.1 Möglichkeiten und Grenzen der Chromosomenaberrationsanalyse mitFISH 75
4.1.2 Chromosomenaberrationsanalyse mit F1SH als vorgezogenem Endpunkt zur Bewertung
von Krebsrisiken in epidemiologischen Studien 76
4.2 CHALLENGEASSAY 78
4.2.1 Cadmium jg
4.2.2 Styrol 78
4.2.3 Mechanistische Ãœberlegungen 81
4.2.4 Variabilität 81
4.2.5 Möglichkeiten und Grenzen des Challenge Assays 82
4.2.6 Erkenntnisse der vorliegenden Arbeit zur Anwendbarkeit des Challenge Assays mit
FISH. 83
4.2.7 Klinische Anwendungen 88
5 ZUSAMMENFASSUNG 89
6 ANHANG 95
6.1 Lymphozytenkultur ...95
6.2 Herstellung der Metaphasenpraparate 95
6.2.1 Waschen der Zellen und hypotonische Behandlung. 95
6.2.2 Fixierung 94
6.2.3 Auftragen der Zellen auf die Objekträger 96
6.3 Amplifdcation und Markierung der Paintingsonden mit Hilfe der PCR 96
6.3.1 Fällen der Sonden 97
6.4 CISS Hybridisierung 97
6.4.1 Vorbereitung des Hybridisierungsgemisch (Hybemix) 97
6.4.2 Behandlung der Objektträger (OT) für die Zellzykluskontrolle 98
6.4.3 Denaturierung der Sonden und Preannealing 98
6.4.4 Denaturierung der Chromosomen undHybridisierung 98
6.4.5 Detektton 9g
6.4.6 Chemikalien and Lösungen /OO
7 ABKÃœRZUNGSVERZEICHNIS_ __. 103
8 LITERATUR 105
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