Untersuchungen zum Mechanismus Cyclosporin-induzierter Cholestase an isolierten Ratten-Hepatozyten-Couplets mittels konfokaler Laser-Zytometrie:
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1997
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adam_text | UNTERSUCHUNGEN ZUM MECHANISMUS CYCLOSPORIN-INDUZIERTER CHOLESTASE AN
ISOLIERTEN RATTEN HEPATOZYTEN COUPLETS MITTELS KONFOKALER LASER
ZYTOMETRIE VOM FACHBEREICH CHEMIE DER UNIVERSITAET KAISERSLAUTERN ZUR
VERLEIHUNG DES AKADEMISCHEN GRADES DOKTOR DER NATURWISSENSCHAFTEN
GENEHMIGTE DISSERTATION. BETREUER: PROF. DR. W.E. TROMMER VORGELEGT VON
JOACHIM KIEFER KAISERSLAUTERN 1997 DATUM DER WISSENSCHAFTLICHEN
AUSSPRACHE: 5.5.1997 1 EINLEITUNG 4 1.1 DIE LEBER 4 1.1.1 STRUKTUR UND
FUNKTION 4 1.1.2 KANALIKULAERE GALLENSEKRETION 7 1.2 CHOLESTASE 9
1.3CYCLOSPORINAUNDPSC833 11 1.3.1 NEBENWIRKUNGEN VON CYCLOSPORIN A UND
PSC 833 13 1.4 AUFGABENSTELLUNG 15 2 MATERIAL UND METHODEN 16 2.1
PRAEPARATION VON RATTEN HEPATOZYTEN 16 2.1.1 PERFUSIONSLOESUNGEN 16 2.1.2
ISOLIERUNG INTAKTER HEPATOZYTEN 17 2.2 ANREICHERUNG VON ISOLIERTEN
RATTEN HEPATOZYTEN COUPLETS (IRHC) 18 2.2.1 ELUTRIATIONSPUJFER 18 2.2.2
APPARATIVES ZUR ZENTRIFUGALEN ELUTRIATION 18 2.2.3 VERSUCHSDURCHFUEHRUNG
19 2.3 KULTIVIERUNG DER ISOLIERTEN HEPATOZYTEN COUPLETS 20 2.4
FLUORESZENZMIKROSKOPISCHE METHODEN 21 2.4.1 APPARATIVES UND PRINZIPIELLE
LASEREINSTELLUNG 21 2.4.2 MESSUNG DES KANALIKULAEREN
GALLENSALZTRANSPORTES VON CHOLYL-LYSYL-FLUORESCEIN (CLF) 22 2.4.3
MESSUNG DER KANALIKULAEREN SEKRETION VON 5-CHLOROMETHYLFLUORESCEIN
DIACETAT (CMFDA) DURCH DEN MULTI ORGANIC ANION TRANSPORTER (MOAT) 24
2.4.4 MESSUNG DES P-GLYKOPROTEIN 170 (PGP-170) VERMITTELTEN TRANSPORTES
25 2.4.5 BESTIMMUNG VON FILAMENTAEREM ACTIN IN IRHC 26 2.4.6 UNTERSUCHUNG
DES TRANSZYTOTISCHEN TRANSPORTES 28 2.5 SPEKTROMETRISCHE UNTERSUCHUNG
VON CHOLYL-LYSYL-FLUORESCEIN 29 2.6 MORPHOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN 30
2.6.1 ELEKTRONENMIKROSKOPISCHE UNTERSUCHUNGEN AN IRHC-MONOLAYER 30 2.6.2
GEFRIERBRUCH-MIKROSKOPIE (FREEZE-FRACTURING) 31 1 2.6.3
IMMUNHISTOCHEMISCHE ANFAERBUNG VON PGP-170 32 2.7 ANALYTISCHE METHODEN 33
2.7.1 RADIOIMMUNASSAY ZUR BESTIMMUNG VON ZEILASSOZIIERTEN CYCLOSPORIN A
UND PSC 833 KONZENTRATIONEN 33 2.7.1.1 BESTIMMUNG DER ZEILASSOZIIERTEN
CSA-KONZENTRATIONEN 33 2.7.1.2 BESTIMMUNG DER ZELLASSOZIIERTEN PSC
833-KONZENTRATIONEN 34 2.7.2 PROTEINBESTIMMUNG 36 2.8 VERWENDETE
MATERIALIEN 38 3 ERGEBNISSE UND DISKUSSION 40 3.1 ZUR AUSWAHL DES
GEEIGNETEN IN VITRO MODELLS FUER UNTERSUCHUNGEN HEPATOBILIAERER
TRANSPORTFUNKTIONEN 40 3.1.1 ZUR PRAEPARATION UND KULTIVIERUNG VON
HEPATOZYTEN-COUPLETS 43 3.1.2 MORPHOLOGISCHE CHARAKTERISIERUNG DER IRHC
47 3.2 ZUR UNTERSUCHUNG DER KANALIKULAEREN TRANSPORTER MIT HILFE VON
FLUORESZIERENDEN SUBSTRATEN 51 3.2.1 KONFOKALE LASER MIKROSKOPIE 51
3.2.2 ZUR UNTERSUCHUNG DES KANALIKULAEREN GALLENSALZTRANSPORTES MIT HILFE
VON CHOLY- LYSYL-FLUORESCEIN (CLF) 51 3.2.3 EINFLUSS VON CSA UND PSC 833
AUF DEN KANALIKULAEREN GALLENSALZ-TRANSPORTER 60 3.2.3.1 SPEKTROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNGEN DER CLF-EMISSIONSEIGENSCHAFTEN 69 3.2.3.2 MESSUNG DER
ZELL-ASSOZIIERTEN KONZENTRATIONEN VON CSA UND PSC 833 IN IRHC 70 3.2.3.3
ZUR UNTERSUCHUNG DES EINFLUSSES VON CSA UND PSC 833 AUF DEN
KANALIKULAEREN GALLENSALZ-TRANSPORTER 72 3.2.4 MESSUNG DES KANALIKULAEREN
MULTI ORGANIC ANION TRANSPORTES MIT HILFE VON 5-
CHLOROMETHYLFLUORESCCEIN DIACETAT (CMFDA) 77 3.2.4.1 EINFLUSS VON CSA UND
PSC 83 3 AUF DEN MULTI ORGANIC ANION TRANSPORTER 81 3.2.4.2 ZUR
UNTERSUCHUNG DES EINFLUSSES VON CSA UND PSC 833 AUF DEN KANALIKULAEREN
MULTI ORGANIC ANION TRANSPORTER (. 85 3.2.5 ZUR UNTERSUCHUNG DES PGP-170
VERMITTELTEN TRANSPORTES VON RHODAMIN 123, BODIPY VERAPAMIL UND
DOXORUBICIN 88 3.2.5.1 IMMUNHISTOCHEMISCHER NACHWEIS DES KANALIKULAEREN
TRANSPORTPROTEINS PGP-170 IN IRHC 90 3.2.5.2 ZUR UNTERSUCHUNG DES
P-GLYKOPROTEINS 170 IN IRHC 91 3.2.6 UNTERSUCHUNG DES TRANSZYTOTISCHEN
TRANSPORTES VON DEXTRAN TEXAS RED 92 3.3 UNTERSUCHUNGEN DER
PERIKANAUKULAEREN MIKROFILAMENTE 95 3.3.1 DAS FILAMENTAERE ACTIN (F-ACTIN)
95 3.3.2 ZUR FLUORESZENZMIKROSKOPISCHEN UNTERSUCHUNG FILAMENTAEREN ACTINS
IN HEPATOZYTEN COUPLETS 96 3.3.3 EINFLUSS VON CSA UND PSC 833 AUF DIE
PERIKANALIKULAEREN MIKROFILAMENTE 102 3.3.4 ZUR UNTERSUCHUNG DES
EINFLUSSES VON CSA UND PSC 833 AUF DAS PERIKANALIKULAERE F- ACTIN 105 4
ZUSAMMENFASSUNG DER ERGEBNISSE 108 5 LITERATURVERZEICHNIS 110
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Paper/Kapitel scannen lassen
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