Untersuchungen zur Wirkung von neuroaktiven Steroiden auf kultivierte Neurone des Hypothalamus der Ratte:
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| Format: | Buch |
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| Veröffentlicht: |
1995
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| Beschreibung: | München, Univ., Fak. für Biologie, Diss., 1996 |
| Umfang: | VII, 100 S. Ill., graph. Darst. |
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| adam_text | UNTERSUCHUNGEN ZUR WIRKUNG VON NEUROAKTIVEN STEROIDEN AUF KULTIVIERTE
NEURONE DES HYPOTHALAMUS DER RATTE INAUGURALDISSERTATION ZUR ERLANGUNG
DES AKADEMISCHEN GRADES EINES DOCTOR RERUM NATURALIUM (DR. RER. NAT.)
AN DER FAKULTAET FUER BIOLOGIE DER LUDWIG-MAXIMILLIANS-UNIVERSITAET,
MUENCHEN VORGELEGT VON CHRISTIAN H. R. WETZEL AUSGEFUEHRT AM
MAX-PLANCK-INSTITUT FUER PSYCHIATRIE DEUTSCHE FORSCHUNGSANSTALT FUER
PSYCHIATRIE KLINISCHES INSTITUT MUENCHEN, IM OKTOBER 1995 IV
INHALTSVERZEICHNIS 1. ZIELSETZUNG DER ARBEIT 1 2. EINLEITUNG 1 2.1. DER
HYPOTHALAMUS 1 2.1.1. MORPHOLOGIE DES HYPOTHALAMUS 1 2.1.2. AUFGAEBEN DES
HYPOTHALAMUS 2 2.2. STEROIDHORMONE 3 2.2.1. NEUROAKTIVE STEROIDE 3
2.2.2. WIRKUNG VON NEUROAKTIVEN STEROIDEN AUF DIE GABAA-
REZEPTOR-VERMITTELTE CR-LEITFAEHIGKEIT 4 2.2.3. SYNTHESE DER
STEROIDHORMONE 5 2.2.4. SYNTHESE DER NEUROSTEROIDE 5 2.3.
LIGANDENGESTEUERTE IONENKANAELE 7 2.3.1. GABA A -REZEPTOREN 7 2.3.1.1.
MOLEKULARBIOLOGIE DES GABA A -REZEPTORS 7 2.3.2. REZEPTOREN
EXCITATORISCHER AMINOSAEUREN 9 2.3.2.1. MOLEKULARBIOLOGIE DER
GLUTAMATREZEPTORUNTEREINHEITEN 11 2.3.2.2. RNA-EDITING BEI
AMPA/KAINAT-REZEPTOREN 11 2.3.2.3. ALTERNATIVES VERSPLEISSEN .^ 11 2.4.
SPANNUNGSAKTIVIERTE IONENKANAELE 12 2.4.1. SPANNUNGSAKTIVIERTE CA 2+
-KANAELE 12 2.4.1.1. MOLEKULARBIOLOGIE DER SPANNUNGSAKTIVIERTEN CA 2+ -
KANAELE 12 2.4.1.2. KLASSIFIZIERUNG DER SPANNUNGSAKTIVIERTEN CA 2+
-KANAELE 13 2.4.2. SPANNUNGSAKTIVIERTE NA + -KANAELE 14 2.4.2.1.
MOLEKULARBIOLOGIE DER SPANNUNGSAKTIVIERTEN NA + - KANAELE 15 2.4.2.2.
BIOPHYSIKALISCHE CHARAKTERISIERUNG 15 2.4.3. SPANNUNGSAKTIVIERTE K +
-KANAELE 16 2.4.3.1.1(DR) UNDL(A) K + -KANAELE 16 2.4.3.2.1(IR) K + -KANAL
17 3. MATERIAL UND METHODEN 18 3.1. ZELLKULTUR 18 3.1.1. KULTURGEFAESSE 18
3.1.2. MEDIEN 18 3.1.3. PRIMAERKULTUR VON HYPOTHALAMUSNEURONEN DER RATTE
19 3.1.3.1. PRAEPARATION DES TIERMATERIALS 19 3.1.3.2. ENZYMATISCHE
DISSOZIATION 20 3.1.3.3. MECHANISCHE TRITURATION 20 3.1.3.4.
EINZELZELLSUSPENSION 21 3.1.3.5. KULTUR IN SERUMFREIEN MEDIUM 21
3.1.3.6. KULTUR IN SERUMSUPPLEMENTIERTEM MEDIUM 21 3.2.
ELEKTROPHYSIOLOGIE 22 3.2.1. ABLEITKAMMER 22 3.2.2. ELEKTRODEN 23 3.2.3.
LOESUNGEN 24 3.2.3.1. PIPETTENLOESUNGEN 24 3.2.3.2. KONTROLLOESUNGEN 24
3.2.4. SUBSTANZEN 24 3.3. SUPERFUSION 26 3.4. MESSANORDNUNG 26 3.5.
DURCHFUEHRUNG DER EXPERIMENTE 28 3.5.1. TRANSMITTERAKTIVIERTE STROEME 29
3.5.2. SPANNUNGSAKTIVIERTE STROEME 29 3.6. STATISTIK 29 4. ERGEBNISSE 30
4.1. ZELLKULTUR 30 4.2. CHARAKTERISIERUNG DER ELEKTROPHYSIOLOGISCHEN
EIGENSCHAFTEN VON KULTIVIERTEN HYPOTHALAMUSNEURONEN DER RATTE 30 4.2.1.
STROM-/SPANNUNGSKENNLINIEN 30 4.3. GABA-INDUZIERTE CL -STROEME 33 4.3.1.
DESENSITISIERUNG DER GABA-REZEPTOREN 37 4.3.2. FADING OUT DES
GABA-INDUZIERTEN CL -STROMS 39 4.3.3. THDOC-EFFEKTE AUF SERUMFREIE
KULTUREN 39 4.3.4. WIRKUNG VON THDOC, THP, DHDOC UND DHP AUF GABA-
INDUZIERTE CL -STROEME SERUMSUPPLEMENTIERTER KULTUREN 42 4.3.5.
ENTWICKLUNG DES GABA-REZEPTIVEN SYSTEMS IN NEURONEN DES HYPOTHALAMUS IN
VITRO 45 4.3.6. VERGLEICH DES GABA-REZEPTIVEN SYSTEMS UND DESSEN
MODULIERBARKEIT DURCH THDOC IN SERUMFREIEN UND SERUMSUPPLEMENTIERTEN
KULTUREN DES HYPOTHALAMUS 45 4.4. THDOC-EFFEKTE AUF SPONTANE
POSTSYNAPTISCHE STROEME 47 4.5. GLUTAMAT-INDUZIERTE KATIONENSTROEME 48 VI
4.6. NMDA-INDUZIERTE KATIONENSTROEME ...50 4.7. SPANNUNGSAKTIVIERTE CA 2+
-STROEME 52 4.7.1. INAKTIVIERUNGSVERHALTEN DER CA 2+ -KANAELE .54 4.7.2.
DEINAKTIVIERUNGSVERHALTEN DER CA 2+ -KANAELE .54 4.7.3. RUNDOWN DER CA
2+ -KANAELE 54 4.7.4. THDOC-EFFEKTE AUF SPANNUNGSAKTIVIERTE CA 2+ -STROEME
55 4.8. SPANNUNGSAKTIVIERTE K + -STROEME 38 4.8.1. THDOC-WIRKUNG AUF
SPANNUNGSAKTIVIERTE K + -STROEME 60 4.9. SPANNUNGSAKTIVIERTE TRANSIENTE
NA + -STROEME .60 4.9.1. THDOC-WIRKUNG AUF SPANNUNGSAKTIVIERTE TRANSIENTE
NA + - STROEME 62 S.DISKUSSION 63 5.1. GABA-INDUZIERTE CR-STROEME 63
5.1.1.DESENSITISIERUNGDESGABAA-REZEPTORS 63 5.1.2. FADING-OUT DES
GABA-INDUZIERTEN CR-STROMS 64 5.1.3. VERSTAERKUNG VON GABA-INDUZIERTEN
CR-STROEMEN DURCH . THDOC 64 5.1.4. MODULATION GABA-INDUZIERTER CT-STROEME
DURCH THDOC 65 5.1.5. DIREKTE UND MODULATORISCHE WIRKUNG VON THDOC 66
5.1.6 MODULATION VON SPONTANEN IPSCS DURCH THDOC :. 66 5.1.7. WIRKUNG
VON THDOC, THP, DHDOC UND DHP AUF GABA- INDUZIERTE D -STROEME
SEMMSUPPLEMENTIERTER HYPOTHALAMUSKULTUREN DER RATTE 67 5.1.8.
ENTWICKLUNG DES GABA-REZEPTIVEN SYSTEMS IN KULTIVIERTEN NEURONEN DES
HYPOTHALAMUS 68 5.1.9. VERGLEICH DES GABA-REZEPTIVEN SYSTEMS UND DESSEN
MODULIERBARKEIT DURCH THDOC IN SERUMFREIEN UND SERUMSUPPLEMENTIERTEN
KULTUREN DES HYPOTHALAMUS 68 5.2. THDOC-WIRKUNG AUF SPANNUNGSAKTIVIERTE
CA 2+ -STROEME .69 5.3. WIRKUNG VON THDOC AUF ANDERE IONENKANAELE 69 6.
ZUSAMMENFASSUNG 71 7. ANHANG.............. 73 7.1. ABKUERZUNGEN 73 7.2.
MEDIENZUSAMMENSETZUNG 75 7.3. PIPETTENLOESUNGEN 77 7.4. KONTROLLOESUNGEN
77 8. LITERATURVERZEICHNIS 78 VII 9. DANKSAGUNG * 95 10. LEBENSLAUF ..
..... 96
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