Verfügbarkeit: Die Rolle von Myokardfibrose und Energiestoffwechsel in drei verschiedenen Kardiomyopathien

Die Rolle von Myokardfibrose und Energiestoffwechsel in drei verschiedenen Kardiomyopathien: Untersuchungen in Mausmodellen der arrhythmogenen-, urämischen- und diabetischen Kardiomyopathie

Gespeichert in:

Bibliographische Detailangaben
Beteilige Person:	Bruns, Florian (VerfasserIn)
Format:	Hochschulschrift/Dissertation Buch
Sprache:	Deutsch
Veröffentlicht:	Aachen [2021]
Schlagwörter:	Herzmuskelkrankheit Fibrose Herzmuskel Energiestoffwechsel Urämie Hochschulschrift
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adam_text	INHALTSVERZEICHNIS INHALTSVERZEICHNIS INHALTSVERZEICHNIS II ABKUERZUNGSVERZEICHNIS VII 1 EINLEITUNG 1 1.1 K ARDIOMYOPATHIEN 1 1.2 A RRHYTHMOGENE K ARDIOMYOPATHIE 4 1.3 D IABETISCHE K ARDIOMYOPATHIE 11 1.4 U RAEMISCHE K ARDIOMYOPATHIE 14 1.5 V ERGLEICH PRIMAERER UND SEKUNDAERER K ARDIOMYOPATHIEN 20 1.6 K ARDIALE F IBROSE 22 1.7 H ERZSTOFFWECHSEL 26 2 ZIELSETZUNG DER ARBEIT 30 3 MATERIAL 31 3.1 M AUSSTAMME 31 3.2 L ABORGEBRAUCHSGEGENSTAENDE UND V ERBRAUCHSMATERIAL 31 3.3 G ERATE 33 3.3.1 LABORAUSSTATTUNG 33 3.3.2 MIKROSKOPE 34 3.4 C HEMIKALIEN UND L OESUNGEN 34 3.5 S ELBST HERGESTELLTE P UFFER UND L OESUNGEN 36 3.5.1 HISTOLOGISCHE ARBEITEN 36 3.5.2 IMMUNOBLOT 37 3.5.3 RNA IN-SITU-HYBRIDISIERUNG 38 3.5.4 IN-SITU PROXIMITY LIGATION ASSAY 39 3.5.5 RNA-AUFBEREITUNG UND REAL-TIME QUANTITATIVE PCR 39 3.6 G EBRAUCHSFERTIGE R EAGENZIEN UND K ITS 39 3.6.1 HISTOLOGISCHE ARBEITEN 39 3.6.2 IMMUNOBLOT 39 3.6.3 IN-SITU PROXIMITY LIGATION ASSAY 40 3.6.4 RNA IN-SITU-HYBRIDISIERUNG (ISH) 40 3.6.5 RNA-ISOLIERUNG UND REAL-TIME QUANTITATIVE PCR 40 3.7 A NTIKOERPER 41 3.7.1 PRIMAERANTIKOERPER 41 3.7.2 SEKUNDAERANTIKOERPER 42 3.8 N ORMALSEREN 43 II INHALTSVERZEICHNIS 3.9 O LIGONUKLEOTIDE UND RNA-H YBRIDISIERUNGSSONDEN 43 3.9.1 OLIGONUKLEOTIDE FUER DIE REAL-TIME QUANTITATIVE PCR 43 3.9.2 SONDEN FUER DIE RNA IN-SITU-HYBRIDISIERUNG 44 3.10 C OMPUTERPROGRAMME 45 3.10.1 COMPUTERPROGRAMME 45 4 METHODEN 46 4.1 A RBEIT MIT V ERSUCHSTIEREN 46 4.1.1 VERSUCHSTIERHALTUNG 46 4.1.2 ARHYTHMOGENE RECHTSVENTRIKULAERE KARDIOMYOPATHIE 46 4.1.3 DIABETES 47 4.1.4 NIERENINSUFFIZIENZ/URAEMIE 47 4.1.5 GEWINNUNG VON GEWEBEPROBEN 48 4.2 H ISTOLOGISCHE UND I MMUNHISTOLOGISCHE A RBEITEN 50 4.2.1 FIXIERUNG UND ANFERTIGUNG VON SCHNITTPRAEPARATEN 50 4.2.2 AZOKARMIN-G ANILINBLAU-GOLDORANGE BZW. AZAN-FAERBUNG 50 4.2.3 IMMUNMARKIERUNGEN VON PROTEINEN 51 4.2.4 ANALYSE VON PROTEININTERAKTIONEN MITTELS IN-SITU PROXIMITY-LIGATION-ASSAY53 4.2.5 ANFERTIGUNG UND AUSWERTUNG MIKROSKOPISCHER AUFNAHMEN 55 4.3 A RBEITEN MIT RNA 57 4.3.1 GEWINNUNG UND AUFBEREITUNG VON RNA-EXTRAKTEN AUS MURINEM HERZGEWEBE 57 4.3.2 SEMIQUANTITATIVE BESTIMMUNG DES GEHALTES BESTIMMTER MRNA-MOLEKUELE MITTELS REAL-TIME QUANTITATIVER PCR 57 4.3.3 BESTIMMUNG DER LOKALISATION VON MRNA-MOLEKUELEN MITTELS IN-SITU RNA HYBRIDISIERUNG 60 4.4 A RBEITEN MIT P ROTEINPROBEN 62 4.4.1 GEWINNUNG UND AUFBEREITUNG VON PROTEINEXTRAKTEN AUS MURINEM HERZGEWEBE 62 4.4.2 SEMIQUANTITATIVE BESTIMMUNG DES GEHALTES BESTIMMTER PROTEINE MITTELS IMMUNOBLOT 62 4.5 S TATISTISCHE D ATENANALYSE 67 5 ERGEBNISSE 68 5.1 C HARAKTERISIERUNG DER VERWENDETEN M AUSMODELLE 68 5.1.1 DESMOGLEIN-MUTIERTE MAEUSE ZEIGEN ARVC-ASSIOZIIERTE PATHOLOGIEN UND ENTWICKELN EINE HERZINSUFFIZIENZ 68 5.1.2 EINE ADENIN-REICHE DIAET INDUZIERT EINE NIERENINSUFFIZIENZ UND URAEMIE 70 III INHALTSVERZEICHNIS 5.1.3 MAEUSE MIT LEPTIN-REZEPTORMUTATION ZEIGEN DEUTLICH ERHOEHTE BLUTZUCKERWERTE 71 5.1.4 FIBROSEAREALE SIND IN HERZEN NIERENINSUFFIZIENTER UND DIABETISCHER MAEUSE NICHT ZU FINDEN 72 5.2 A N AC ERKRANKTE M AUSE ZEIGEN EINE DEUTLICHE G EF A BRAREFIZIERUNG 75 5.2.1 FABP5 WIRD SELEKTIV IN ENDOTHEL EXPRIMIERT 75 5.2.2 IN FIBROSENAHEM MYOKARD IST DIE KAPILLARDICHTE SIGNIFIKANT VERMINDERT 76 5.3 D IE E XPRESSION ZAHLREICHER AM S TOFFWECHSEL BETEILIGTER G ENE IST IN DEN UNTERSUCHTEN MAUSMODELLEN AUF MRNA-EBENE VERAENDERT 79 5.3.1 DSG2-MUTIERT 79 5.3.2 DIABETES 82 5.3.3 NIERENINSUFFIZIENZ/URAEMIE 82 5.4 D ER P ROTEINGEHALT VON FABP5 UND GLUT1 IST IN D SG 2 MUTIERTEN H ERZEN ERHOEHT, PPARA ERNIEDRIGT 86 5.4.1 DSG2-MUTIERT 86 5.4.2 DIABETISCH 87 5.4.3 NIERENINSUFFIZIENT/URAEMISCH 87 5.4.4 ABBILDUNGEN 87 5.5 F IBROSENAHES M YOKARD D SG 2 MUTIERTER M AEUSE ZEIGT EINE T ENDENZ ZU ERHOEHTER GLUT1 UND EINE SIGNIFIKANT VERMINDERTE PPARA-EXPRESSION 92 5.6 G ENAUE C HARAKTERISIERUNG DER E XPRESSION VON G LUT 1 IN D ESMOGLEIN 2 MUTIERTEN MAUSEN 94 5.6.1 DER SRF-KOAKTIVATOR MKL1 IST NICHT ALLEINIGER AUSLOESER FUER EINE ERHOEHTE GLUTL-EXPRESSION 94 5.6.2 GLUT1-MRNA WIRD VON KARDIOMYOZYTEN EXPRIMIERT 96 5.6.3 GLUTL - UND ACTAL-MRNA WERDEN WAHRSCHEINLICH KOEXPRIMIERT 99 5.6.4 NUR KARDIOMYOZYTEN NAHE FIBROTISCHER LAESIONEN EXPRIMIEREN GLUT1 101 5.6.5 GLUTL LOKALISIERT IN DESMOGLEIN-MUTIERTEN MAEUSEN AN DIE GLANZSSTREIFEN 104 5.7 D IE P HOSPHORYLIERUNGEN VON AMPK UND GSK3 B SIND NUR UNWESENTLICH VERAENDERT 106 5.7.1 DSG2-MUTIERT 106 5.7.2 DIABETISCHE MAEUSE 109 5.7.3 URAEMISCHE MAEUSE 111 5.8 D IE I NTERAKTION VERSCHIEDENER PPAR-I SOFORMEN MIT IHREM K OAKTIVATOR PGC1 A KOENNTE MITTELS PLA UNTERSUCHT WERDEN 112 6 DISKUSSION 115 IV INHALTSVERZEICHNIS 6.1 E INE R AREFIZIERUNG DER K APILLAREN TRAEGT ZUR P ATHOGENESE DER AC BEI 118 6.1.1 FIBROSENAHES MYOKARD IST VERMUTLICH SCHLECHTER DURCHBLUTET ALS FIBROSEFERNES 118 6.1.2 DIE URSACHE DER PERIFIBROTISCHEN GEFAESSRAREFIZIERUNG KOENNTE FOLGE EINER INFLAMMATION UND PATHOLOGISCHEN HYPERTROPHIE SEIN 122 6.1.3 DIE UEBEREXPRESSION VON FABP5 IST NICHT FOLGE EINER VERMEHRTEN KAPILLARDICHTE IN DSG2-MUTIERTEN MAEUSEN 123 6.2 D IE U MSTELLUNG VON EMBRYONALEM AUF POSTNATALEN S TOFFWECHSEL LAEUFT BEI DSG2-MUTIERTEN TIEREN VERZOEGERT AB 125 6.2.1 JUNGE DESMOGLEIN-2-MUTIERTE MAEUSE ZEIGEN HINWEISE AUF EINEN GESTEIGERTEN KARDIALEN GLUCOSESTOFFWECHSEL 126 6.3 B EI DC UND UC GEHT METABOLISCHES - STRUKTURELLEM R EMODELLING VORAUS 131 6.3.1 IN FRUEHEN STADIEN VON DIABETISCHER UND URAEMISCHER KARDIOMYOPATHIE FINDET SICH KEINE FIBROSE 132 6.3.2 BEI DC UND UC ZEIGEN SICH FRUEHE EXPRESSIONSVERAENDERUNGEN METABOLISCHER GENE 134 6.3.3 DIE ROLLE VON GSK3SS IM KONTEXT DER URAEMISCHEN KARDIOMYPATHIE SOLLTE WEITER ERFORSCHT WERDEN 136 6.3.4 METABOLISCHES GEHT STRUKTURELLEM REMODELLING BEI SEKUNDAEREN KARDIOMYOPATHIEN VORAUS 137 6.4 D ER KARDIOMYOZYTAERE E NERGIEHAUSHALT IST BEI K ARDIOMYOPATHIEN NICHT ZWANGSLAEUFIG GESTOERT 142 6.5 D IE R EGULATION UND F EHLLOKALISATION DES G LUCOSE -T RANSPORTERS GLUT1 IST ZENTRALER BESTANDTEIL DER AC-PATHOGENESE 145 6.6 L IMITATIONEN 150 6.6.1 DIE UNTERSUCHUNGEN AN DEN URAEMISCHEN UND DIABETISCHEN MAUSMODELLEN SOLLTEN DURCH DATEN ZUR HERZFUNKTION ERWEITERT WERDEN 150 6.6.2 DER ENERGIEHAUSHALT DER KARDIOMYOZYTEN IN DEN HIER VERWENDETEN MAUSMODELLEN SOLLTE TIEFERGEHEND ERFORSCHT WERDEN 150 6.6.3 FOKALE PATHOLOGIEN ERFORDERN FOKALE UNTERSUCHUNGEN 151 7 ZUSAMMENFASSUNG 153 8 SUMMARY 154 9 LITERATURVERZEICHNIS 155 10 ABBILDUNGSVERZEICHNIS 175
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