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| Format: | Hochschulschrift/Dissertation Buch |
| Sprache: | Deutsch |
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2015
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|---|---|
| adam_text | AUS DER MEDIZINISCHEN KLINIK UND POLIKLINIK IV
DER LUDWIG-MAXIMILIANS-UNIVERSITAET MUENCHEN
(DIREKTOR: PROF. DR. MED. MARTIN REINCKE)
SEKTION FUER RHEUMATOLOGIE UND KLINISCHE IMMUNOLOGIE
(LEITER: PROF. DR. MED. HENDRIK SCHULZE-KOOPS)
CHARAKTERISIERUNG UND FUNKTION VON IL-22-PRODUZIERENDEN
T-LYMPHOZYTEN BEI AUTOIMMUNARTHRITIDEN
DISSERTATION
ZUM ERWERB DES DOKTORGRADES DER MEDIZIN
AN DER MEDIZINISCHEN FAKULTAET DER
LUDWIG-MAXIMILIANS-UNIVERSITAET ZU MUENCHEN
VORGELEGT VON
MARKUS ALEXANDER SCHRAMM
AUS
FREIBURG IM BREISGAU
2015
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INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG 1
1.1. DAS IMMUNSYSTEM DES MENSCHEN 1
1.1.1. ALLGEMEINER UEBERBLICK 1
1.1.2. ANGEBORENE UND ERWORBENE IMMUNABWEHR 1
1.1.3. T-LYMPHOZYTEN 2
1.1.4. CD4
+
T-ZELL DIFFERENZIERUNG 3
1.1.4.1. NAIVE CD4
+
T -LYMPHOZYTEN 3
1.1.4.2. MEMORY CD4
+
T-LYMPHOZYTEN 4
1.1.4.3. CD4
+
T-EFFEKTOR-ZELLEN 5
1.1.4.3.1. THL/TH2 PARADIGMA 5
1.1.4.3.2. THL7-ZELLEN 8
1.1.4.3.3. REGULATORISCHE T-ZELLEN 9
1.1.4.3.4. TH9-ZELLEN 11
1.2. INTERLEUKIN 22 12
1.2.1. IL-22-PRODUZIERENDE ZELLEN 12
1.2.2. REGULATION VON IL-22 DURCH TRANSKRIPTIONSFAKTOREN 13
1.2.3. IL-22 REZEPTOR UND SIGNALKASKADE 14
1.2.4. EFFEKTORFIINKTIONEN VON IL-22 IS
1.2.4.1. WIRKUNG VON IL-22 BEI INFEKTIONEN 15
1.2.4.2. BEDEUTUNG VON IL-22 FUER EPITHELINTEGRITAET UND WUNDHEILUNG 16
1.2.4.3. BEDEUTUNG VON IL-22 IN DER PATHOGENESE VERSCHIEDENER
ERKRANKUNGEN 17
1.2.5. BEDEUTUNG VON CD4
+
T-ZELLEN FUER AUTOIMMUNARTHRITIDEN 19
1.2.5.1. BEDEUTUNG VON INTERLEUKIN-17 BEI AUTOIMMUNEN ARTHRITIDEN 20
1.2.5.2. BEDEUTUNG VON INTERLEUKIN-22 BEI AUTOIMMUNEN ARTHRITIDEN 22
1.3. FRAGESTELLUNG UND ZIELSETZUNG 23
2. MATERIALIEN UND METHODEN 24
2.1. MATERIALIEN 24
2.1.1. GERAETE 24
2.1.2. REAGENZIEN, ENZYME, ZYTOKINE 25
2.1.3. ANTIKOERPER 26
2.1.4. KITS 27
2.1.5. PUFFER 28
2.1.6. GENE EXPRESSION ASSAYS FUER DAS HUMANE GENOM 28
2.1.7. PRIMER FUER DAS
HUMANE GENOM 28
2.2. METHODEN 29
2.2.1. PATIENTENKOLLEKTIV 29
2.2.2. ISOLATION VON HUMANEN CD4
+
T-LYMPHOZYTEN 30
2.2.2.1. ISOLATION VON HUMANEN CD4
+
T-LYMPHOZYTEN AUS DEM BLUT 30
2.2.2.1.1. DICHTEGRADIENTZENTRIFUGATION UND ERYTHROZYTENROSETTIERUNG 30
2.2.2.1.2. PANNING 31
2.2.2.1.3. MAGNETIC CELL SEPARATION (MACS) 31
2.2.2.2. ISOLATION VON HUMANEN CD4
+
T-ZELLEN AUS SYNOVIALER FLUESSIGKEIT 32
2.2.2.3. KONTROLLE DER REINHEIT
DER ISOLIERTEN ZELLEN DURCH DURCHFLUSSZYTOMETRIE 33
2.2.3. DURCHFLUSSZYTOMETRIE 33
2.2.3.1. DURCHFLUSSZYTOMETRIE ZUR MESSUNG VON OBERFLAECHENMOLEKUELEN 34
2.2.3.2. DURCHFLUSSZYTOMETRIE ZUR MESSUNG VON INTRAZELLULAEREN ZYTOKINEN
34
2.2.4. ZELLKULTUR 35
2.2.4.1. CD4
+
T-ZELLEN 35
2.2.4.2. MEMORY CD4
+
T-ZELLEN 35
2.2.4.3. NAIVE CD4
+
T-ZELLEN 36
2.2.5. RNA ISOLATION 36
2.2.6. REVERSE TRANSKRIPTION-POLYMERASEKETTENREAKTION (RT-PCR) 37
2.2.6.1. CDNA SYNTHESE 37
2.2.6.2. POLYMERASEKETTENREAKTION (PCR) 37
2.2.6.3. AGAROSE-GELELEKTROPHORESE 38
2.2.7. QUANTITATIVE ECHTZEIT PCR (REAL-TIME QUANTITATIVE PCR, QRT-PCR)
38
2.2.8. ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY (ELISA) 39
2.2.8.1. INTERLEUKIN-22 ELISA 39
2.2.8.2. INTERLEUKIN-17 ELISA 40
2.2.8.3. TUMORNEKROSEFAKTOR ELISA 40
2.2.9. STATISTIK 40
3. ERGEBNISSE 42
3.1. REGULATION UND DIFFERENZIERUNG VON IL-22-PRODUZIERENDEN CD4
+
T-ZELLEN 42
3.1.1. DIFFERENZIERUNG VON IL-22-PRODUZIERENDEN MEMORY CD4
+
T-ZELLEN 42
3.1.2. DIFFERENZIERUNG VON IL-22-PRODUZIERENDEN NAIVEN CD4
+
T-ZELLEN 45
3.1.3. TRANSKRIPTIONELLE REGULATION VON IL-22 48
3.2. IL-22 BEI PATIENTEN MIT AUTOIMMUNEN ARTHRITIDEN SO
3.2.1. IL-22-PRODUZIERENDE CD4
+
T-ZELLEN IM BLUT VON PATIENTEN MIT RHEUMATOIDER
ARTHRITIS SO
3.2.2. IL-22-PRODUZIERENDE CD4
+
T-ZELLEN IM BLUT VON PATIENTEN MIT PSORIASIS
ARTHRITIS 52
3.2.3. IL-22-PRODUZIERENDE CD4
+
T-ZELLEN IN DER SYNOVIALFLUESSIGKEIT VON PATIENTEN
MIT RHEUMATOIDER ARTHRITIS 53
3.2.4. IL-22-PRODUZIERENDE MEMORY CD4
+
T-ZELLEN 54
3.2.4.1. IL-22-PRODUZIERENDE MEMORY CD4
+
T-ZELLEN BEI RA PATIENTEN 55
3.2.4.2. IL-22-PRODUZIERENDE MEMORY CD4
+
T-ZELLEN BEI PSA PATIENTEN 57
3.3. IL-22 ALS
SERUM- PROGNOSEMARKER FUER KNOCHENEROSIONEN 59
3.3.1. STUDIENPOPULATIONEN DER IL-22-SERUMANALYSEN 59
3.3.2. IL-22-SERUMWERTE DER PATIENTEN MIT RHEUMATOIDER ARTHRITIS 62
3.3.3. IL-22-SENIMWERTE DER PATIENTEN MIT PSORIASIS ARTHRITIS UND
ARTHROSE 65
3.3.4. IL-22-KONZENTRATIONEN IN DER SYNOVIALFLUESSIGKEIT VON PATIENTEN
MIT
AUTOIMMUNEN ARTHRITIDEN 65
4. DISKUSSION 67
4.1. PRODUKTION UND REGULATION VON IL-22 IN CD4
+
T-ZELLEN 67
4.1.1. IL-1
SS UND IL-21 INDUZIEREN IL-22-PRODUZIERENDE TH 17-ZELLEN 67
4.1.2. IL-22 DEFINIERT EINE
EIGENSTAENDIGE POPULATION VON TH22-ZELLEN 69
4.1.3. UNTERSCHIEDE IN DER REGULATION VON IL-22 UND IL-17 71
4.2. IL-22 IN DER PATHOGENESE AUTOIMMUNER ARTHRITIDEN 73
4.2.1. T-HELFERZELLEN ALS ZELLULAERE QUELLE VON IL-22 BEI PATIENTEN MIT
RHEUMATOIDER
ARTHRITIS 73
4.2.2. T-HELFERZELLEN ALS ZELLULAERE QUELLE VON IL-22 BEI PATIENTEN MIT
PSORIASIS
ARTHRITIS 77
4.2.3. IL-22-KONZENTRATIONEN IM SERUM UND DER SYNOVIALFLUESSIGKEIT VON
PATIENTEN MIT
RHEUMATOIDER ARTHRITIS ODER PSORIASIS-ARTHRITIS 78
4.2.4. IL-22-SENIMKONZENTRATIONEN KORRELIEREN MIT DEM AUFTRETEN VON
KNOCHENEROSIONEN BEI DIAGNOSESTELLUNG EINER RHEUMATOIDER ARTHRITIS 79
4.2.5. IL-22
- EINE WEITERE SCHLUESSELFIGUR DER KNOCHENDESTRUKTION? 81
4.2.6. IL-22
- EIN THERAPEUTISCHES ZIELMOLEKUEL ODER EIN PRAEDIKTIVER MARKER? 83
5. ZUSAMMENFASSUNG 85
6. ABKOERZUNGSVERZEICHNIS 87
7. LITERATURVERZEICHNIS 89
8. DANKSAGUNG 105
9. VEROEFFENTLICHUNGEN 106
10. EIDESSTATTLICHE ERKLAERUNG 109
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