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| Veröffentlicht: |
2014
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|---|---|
| adam_text | INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
ABSTRACT VI
ZUSAMMENFASSUNG VII
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS IX
1 EINLEITUNG 1
1.1 UEBERGEWICHT UND ADIPOSITAS 1
1.2 INTESTINALE MIKROBIOTA 1
1.2.1 ZUSAMMENSETZUNG DER INTESTINALEN MIKROBIOTA UND UEBERGEWICHT 3
1.2.2 INTESTINALE MIKROBIOTA UND ENERGIEHOMOEOSTASE 5
1.2.3 INTESTINALE MIKROBIOTA UND METABOLISCHE ENDOTOXAEMIE 9
1.2.4 MODULATION DER INTESTINALEN MIKROBIOTA DURCH PRAEBIOTIKA 11
1.3 ZIELSTELLUNG DIESER ARBEIT 14
2 MATERIAL UND METHODEN 16
2.1 CHEMIKALIEN UND GERAETE 16
2.2 NAEHRMEDIEN UND AGAR 16
2.3 TIEREXPERIMENTELLE METHODEN 16
2.3.1 HALTUNG DER VERSUCHSTIERE 16
2.3.2 VERSUCHSDIAETEN 17
2.3.3 VERSUCHSDESIGN 19
2.3.4 ASSOZIIERUNG DER TIERE MIT BAKTERIEN 21
2.3.5 KONTAMINATIONSKONTROLLE DER GNOTOBIOTISCHEN TIERMODELLE 22
2.3.6 BESTIMMUNG DER KOERPERZUSAMMENSETZUNG DER VERSUCHSTIERE 22
2.3.7 BESTIMMUNG DER ENERGIEAUFNAHME 23
2.3.8 BESTIMMUNG DES ENERGIEUMSATZES UND DES RESPIRATORISCHEN QUOTIENTEN
MITTELS INDIREKTER KALORIMETRIE 23
2.3.9 BESTIMMUNG DER DARMPERMEABILITAET 25
2.3.10 ORALER GLUCOSE-TOLERANZ-TEST 25
2.4 MIKROBIOLOGISCHE METHODEN 26
2.4.1 BEHANDLUNG DER PROBEN ZUR CHARAKTERISIERUNG DER INTESTINALEN
MIKROBIOTA 26
2.4.2 FLUORESZENZ IN SITU HYBRIDISIERUNG (FISH) 26
2.4.3 GRAM-FAERBUNG 28
2.4.4 BESTIMMUNG DER LEBENDZELLZAHL 28
2.4.5 BESTIMMUNG DER GESAMTZELLZAHL 29
2.5 MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN 29
III
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INHALTSVERZEICHNIS
2.5.1 POLYMERASE-KETTENREAKTION (PCR) -GEKOPPELTE DENATURIERENDE
GRADIENTEN-GEL-ELEKTROPHORESE (DGGE) UND CLUSTERANALYSE 29
2.5.2 PCR-AMPLIFIKATION UND KLONIERUNG BAKTERIELLER 16S RRNA-GENE 30
2.5.3 QUANTITATIVE REAL-TIME PCR (QPCR) ZUR BESTIMMUNG DER
ZUSAMMENSETZUNG DER SIMPLIFIZIERTEN HUMANEN MIKROBIOTA 31
2.5.4 EXTRAKTION DER GESAMT-RNA 32
2.5.5 VERDAU GENOMISCHER DNA 33
2.5.6 CDNA-SYNTHESE 33
2.5.7 QUANTITATIVE REAL-TIME PCR 34
2.6 BIOCHEMISCHE METHODEN 35
2.6.1 BESTIMMUNG DER KONZENTRATION KURZKETTIGER FETTSAEUREN 35
2.6.2 BESTIMMUNG DER LACTAT-KONZENTRATION 35
2.6.3 TRIGLYCERIDBESTIMMUNG 35
2.6.4 LIMULUS AMEBOCYTE LYSAT (LAL)-ASSAY 36
2.7 STATISTIK 36
3 ERGEBNISSE 37
3.1 EINFLUSS DER INTESTINALEN MIKROBIOTA AUF DIE ENTSTEHUNG VON
ADIPOSITAS 37
3.1.1 EINFLUSS DER SEMISYNTHETISCHEN NIEDRIGFETT- UND HOCHFETTDIAET AUF
KEIMFREIE UND KONVENTIONELL BESIEDELTE MAEUSE (VERSUCH I) 37
3.1.2 VERGLEICH DES EINFLUSSES EINER HOCHFETTDIAET UND EINER HOCHFETTDIAET
IM
*WESTERN STYLE AUF DIE ENTSTEHUNG VON ADIPOSITAS IN KEIMFREIEN UND
KONVENTIONELLEN MAEUSEN (VERSUCH II)
45
3.1.3 EINFLUSS DER BEIDEN HOCHFETTDIAETEN HFD UND WD AUF DIE
ZUSAMMENSETZUNG DER INTESTINALEN MIKROBIOTA UND DEREN METABOLITE
(VERSUCH III) 52
3.1.4 INTEREXPERIMENTELLE VARIANZ DER KOERPERGEWICHTE KEIMFREIER UND
KONVENTIONELLER MAEUSE 55
3.2 EINFLUSS VON BIFIDOBAKTERIEN UND OLIGOFRUCTOSE AUF PARAMETER DER
METABOLISCHEN ENDOTOXAEMIE IN MAEUSEN MIT DIAETINDUZIERTEM UEBERGEWICHT 58
3.2.1 EINFLUSS VON BIFIDOBAKTERIEN UND OLIGOFRUCTOSE AUF PARAMETER DER
METABOLISCHEN ENDOTOXAEMIE IN KONVENTIONELLEN MAEUSEN 58
3.2.2 EINFLUSS VON BIFIDOBACTERIUM LONGUM UND OLIGOFRUCTOSE AUF
PARAMETER
DER METABOLISCHEN ENDOTOXAEMIE IN GNOTOBIOTISCHEN MAEUSEN 61
4 DISKUSSION 73
4.1 EINFLUSS DER INTESTINALEN MIKROBIOTA AUF DIE ENTSTEHUNG
DIAETINDUZIERTER
ADIPOSITAS 73
4.1.1 KEIMFREIE MAEUSE SIND NICHT GENERELL VOR DER ENTWICKLUNG
DIAETINDUZIERTER
ADIPOSITAS GESCHUETZT 73
4.1.2 DIE ZUSAMMENSETZUNG DER HOCHFETTDIAET IST RELEVANT FUER DIE
ENTSTEHUNG
DIAETINDUZIERTER ADIPOSITAS IN KEIMFREIEN MAEUSEN 74
IV
INHALTSVERZEICHNIS
4.1.3 DIE INTESTINALE MIKROBIOTA BEEINFLUSST DIE ENERGIEBILANZ 76
4.1.4 SEMISYNTHETISCHE DIAETEN FUEHREN ZU EINER VERRINGERTEN DIVERSITAET
UND
VERAENDERUNGEN IN DER ZUSAMMENSETZUNG DER INTESTINALEN MIKROBIOTA . 77
4.1.5 MECHANISMEN 81
4.2 WECHSELWIRKUNG VON OLIGOFRUCTOSE, BIFIDOBAKTERIEN UND METABOLISCHER
ENDOTOXAEMIE 85
4.2.1 DIE ZUSAMMENSETZUNG DER INTESTINALEN MIKROBIOTA SCHEINT DIE
EFFFEKTE
VON OFS AUF KOERPERGEWICHTSENTWICKLUNG, KOERPERFETTGEHALT UND DIE
GLUCOSETOLERANZ ZU BEEINFLUSSEN
86
4.2.2 UNABHAENGIG VON BIFIDOBACTERIUM LONGUM SCHUETZT OLIGOFRUCTOSE
GNOTOBIOTISCHE MAEUSE VOR DER ENTSTEHUNG DIAETINDUZIERTER ADIPOSITAS... 87
4.2.3 DIE ZUSAMMENSETZUNG DER INTESTINALEN MIKROBIOTA IM GNOTOBIOTISCHEN
MAUSMODELL VERAENDERT SICH IN ABHAENGIGKEIT VON DER DIAET 88
4.2.4 IM GNOTOBIOTISCHEN MAUSMODELL WIRD DURCH DIE HOCHFETTDIAET WEDER
EINE
SYSTEMISCHE ENTZUENDUNG, NOCH EINE ERHOEHUNG DER ENDOTOXINLEVEL, NOCH
EINE VERAENDERUNG DER BARRIEREINTEGRITAET DES DARMS INDUZIERT
90
4.2.5 SCFA BESITZEN KEINEN EINFLUSS AUF DIE INTESTINALE EXPRESSION VON
FFAR3
UND PYY 91
4.2.6 WIRKUNGSWEISE VON OLIGOFRUCTOSE AUF GEWICHTSENTWICKLUNG,
KOERPERZUSAMMENSETZUNG UND GLUCOSEPROFIL 93
ZUSAMMENFASSUNG WICHTIGER ERKENNTNISSE UND NEUE FORSCHUNGSANSAETZE
95
LITERATURVERZEICHNIS 98
ANHANG 109
7.1 MEDIEN, PUFFER, LOESUNGEN 109
7.2 ABBILDUNGSVERZEICHNIS 114
7.3 TABELLENVERZEICHNIS 116
7.4 DANKSAGUNG 119
7.5 EIDESSTATTLICHE VERSICHERUNG 120
V
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