PTEN als Modulator von Östrogenrezeptor- und Tyrosinkinase-Signalwegen in Brust- und Endometriumkarzinomzellen unter Tamoxifenbehandlung:
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2013
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INHALTSVERZEICHNIS
1. ZUSAMMENFASSUNG 1
2. EINLEITUNG 5
2.1. OESTROGENREZEPTOR-SIGNALWEGE 5
2.1.1. KLASSISCH GENOMISCHE WIRKUNGEN VON OESTROGEN 5
2.1.2. ALTERNATIVE GENOMISCHE EFFEKTE VON OESTROGEN 6
2.1.3. SCHNELLE NON-GENOMISCHE WIRKUNGEN VON OESTROGEN 8
2.1.4. STRUKTUR DES OESTROGENREZEPTORS 8
2.2. TYROSINKINASE-SIGNALWEGE 11
2.3. BRUSTKREBS 15
2.3.1. EPIDEMIOLOGIE 15
2.3.2. STAGING UND GRADING 16
2.3.3. THERAPIE DES BRUSTKREBSES 18
2.4. ZIELSETZUNG 25
3. MATERIALIEN UND METHODEN 26
3.1. CHEMIKALIEN 26
3.2. ENZYME UND KITS 28
3.3. DNA UND VEKTOR-KONSTRUKTE 28
3.4. PUFFER, LOESUNGEN UND MEDIEN 29
3.5. GERAETE UND VERBRAUCHSMATERIALIEN 32
3.6. ZELLKULTUR 34
3.7. TRANSFEKTIONEN VON ZELLEN UND HORMONBEHANDLUNGEN 35
3.8. GEWINNUNG VON PROTEINLYSATEN 36
3.9. IMMUNOBLOT ANALYSEN 37
3.10. RNA-EXTRAKTION AUS GESAMTBLUT 39
3.11. REVERSE-TRANSKRIPTASE-PCR 40
3.12. AGAROSE-GELE 42
3.13. GELEXTRAKTION, AUFREINIGUNG UND KONZENTRATIONSBESTIMMUNG VON DNA
42
3.14. MINI-PRAEPARATION 43
3.15. MIDI-PRAEPARATION 44
3.16. INKUBATION MIT RESTRIKTIONSENZYMEN 44
3.17. LIGATION UND TRANSFORMATION 47
3.18. KOLONIE-PCR 50
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4. RESULTATE 51
4.1. VERGLEICH VON VIER ZELLLINIEN BEZUEGLICH IHRER
AKT-SIGNALWEG-AKTIVIERUNG 51
4.2. KLONIERUNG UND TRANSGENE EXPRESSION VON PTEN 60
4.3. MODULATION DER TAMOXIFEN-VERMITTELTEN AKT-AKTIVIERUNG DURCH PTEN 67
5. DISKUSSION 69
5.1. SYNERGISMUS VON SCHNELLER UND GENOMISCHER OESTROGENREZEPTOR
SIGNALWIRKUNG... 70
5.2. MOEGLICHE REZEPTOREN FUER OESTROGEN UND TAMOXIFEN AN DER ZELLMEMBRAN
71
5.3. BEDEUTUNG DER AKT-SIGNALWEG AKTIVIERUNG BEI RESISTENZENTWICKLUNGEN
75
5.4. KOMBINIERTE INHIBITION VON OESTROGENREZEPTOR- UND
TYROSINKINASE-SIGNALWEGEN
ALS NEUARTIGER THERAPIEANSATZ 80
5.5. LIMITATIONEN DIESER ARBEIT 83
5.6. AUSBLICK 85
6. LITERATURVERZEICHNIS 86
7. ANHANG 105
7.1. ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 105
7.2. ABBILDUNGSVERZEICHNIS 109
7.3. TABELLENVERZEICHNIS 111
7.4. VEROEFFENTLICHUNGSVERZEICHNIS 112
7.5. DANKSAGUNG 114
7.6. LEBENSLAUF 115
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