Funktionelle Bedeutung und pharmakologische Beeinflussung von Prostaglandin E2 in isolierten Magenschleimhautzellen der Ratte:
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1988
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FUNKTIONELLE BEDEUTUNG UND PHARMAKOLOGISCHE BEEINFLUSSUNG VON
PROSTAGLANDIN E 2 IN ISOLIERTEN MAGENSCHLEIMHAUTZELLEN DER RATTE
D I S S E R T A T I ON
DER FAKULTAET FUER CHEMIE UND PHARMAZIE DER EBERHARD-KARLS-UNIVERSITAET
TUEBINGEN ZUR ERLANGUNG DES GRADES EINES DOKTORS DER NATURWISSENSCHAFTEN
1988
VORGELEGT VON
ANDREAS FRISCH
C^?TI&
IMAGE 2
INDEX
1. EINLEITUNG
1.1. DAS PROSTAGLANDINSYSTEM - GESCHICHTLICHE ENTWICKLUNG 1 1.2.
SYNTHESE UND ABBAU 1
1.3. PHYSIOLOGISCHE WIRKUNG UND FUNKTION 3
1.4. PROSTAGLANDINE UND GASTROINTESTINALE FUNKTIONEN 4 1.4.1. UORKOMMEN
4
1.4.2. FUNKTIONEN AM DARM 5
1.4.3. FUNKTIONEN AM HAGEN - 5
1.4.3.1. DIE PHYSIOLOGISCHE RUFGABE DES FLAGENS 5
1.4.3.2. RUFBAU DER FLAGENSCHLEIMHAUT 5
1.4.3.3. EINFLUSS DER PROSTAGLANDINE AUF DIE SAEURESEKRETION 5 1.4.3.4.
PROSTAGLANDINE UND TLUCOSAPROTEKTION 7
1.5. FRAGESTELLUNG ^ - 9
2. METHODIK
2.1. HESSMETHODEN FUER PROSTAGLANDIN E 2 11
2.2. ENTWICKLUNG EINES RADIOIMMUNOASSAYS FUER PROSTAGLANDIN E 2 -
METHODISCHE PROBLEME UND ERGEBNISSE 11
2.2.1. PRINZIP DER HESSMETHODE 11
2.2.2. FLNTIGENHERSTELLUNG 11
2.2.3. IMMUNISIERUNG 13
2.2.4. BLUTABNAHME 13
2.2.5. PRUEFUNG DER FTNTISEREN 14
2.2.6. EINFLUSS DER SERUMVERDUENNUNG 17
2.2.7. SPEZIFITAT DER FLNTISEREN, STANDARDKURVEN 18
2.2.8. PRUEFUNG DER FLNTISEREN DURCH TIESSUNG VON PGE ; - SPIEGELN IN
ISOLIERTEN ZELLEN DER RATTENMAGENSCHLEIMHAUT 19 2.2.9. NACHUEISGRENZE ,
20
2.2.10. EMPFINDLICHKEIT 21
2.2.11. PH-UERT UND NULLBINDUNG 22
2.2.12. EINFLUSS VON ETHANOL AUF DIE NULLHINDUNG 22
2.2.13. EINFLUSS DER TRACERVERDUENNUNG 23
2.2.14. FLUSWAHL DES TRENNUNGSVERFAHRENS DER FREIEN VON DER GEBUNDENEN
RADIOAKTIVITAET - 23
2.2.15. AUSWERTUNG DES RADIOIMROUNOASSAYS 25
2.2.16. KENNDATEN DES RADIOIMICUNOASSAYS 25
2.2.17. ALLGEMEINE ARBEITSVORSCHRIFT FUER DEN RADIOIIRMUNOASSAY 27
2.2.18. VERGLEICH VERSCHIEDENER FLESSYSTEME 27
IMAGE 3
2.3. ISOLIERUNG UND FRAKTIONIERUNG VON ZELLEN DER
TIAGENSCHLEIMHAUT DER RATTE 29
2.3.1. ISOLIERUNG DER ZELLEN 29
2.3.2. FRAKTIONIERUNG DER ZELLSUSPENSION 30
2.3.3. INKUBATION ISOLIERTER ZELLEN - STANDARDVORSCHRIFT 30 2.3.4.
BERECHNUNG DER ERGEBNISSE 31
2.3.5. STATISTISCHE AUSWERTUNG 31
3. VERWENDETE FIATERIALIEN UND GERAETE
3.1. MATERIALIEN 32
3.2. GERAETE 34
4. ERGEBNISSE
4.1. EINFLUSS EXPERIMENTELLER BEDINGUNGEN AUF DIE PGE 2 -FREISETZUNG IN
VITRO AUS ISOLIERTEN HAGENSCHLEIMHAUTZELLEN DER RATTE - 35
4.1.1. ZEITABHAENGIGKEIT DER BASALEN PGE 2 -FREISETZUNG 35
4.1.1.1. VERGLEICH VON PGE 2 - KONZENTRATIONEN IM UEBERSTAND NACH 0 UND
60 MINUTEN INKUBATIONSDAUER 36
4.1.2. ABHAENGIGKEIT DER PGE,-FREISETZUNG VON DER ZELLKONZENTRATION 36
4.1.3. EINFLUSS VON PH-UERT, ATMOSPHAERE UND SCHUETTELFREQUENZ AUF DIE
BASALE PGE 2 -FREISETZUNG 38
4.1.4. EINFLUSS DER LAGERDAUER ISOLIERTER ZELLEN IN EIS AUF DIE PGE 2 -
FREISETZUNG 40
4.1.5. EINFLUSS NIEDERENERGETISCHER ULTRASCHALLBEHANDLUNG ISOLIERTER
ZELLEN AUF DIE PGE 2 -FREISETZUNG 41
4.1.6. ZUSAMMENFASSUNG DER EXPERIMENTEILEN BEDINGUNGEN 43 4.2.
FREISETZUNG VON PGE 2 UNTER PHYSIOLOGISCHEN ASPEKTEN 44 4.2.1.
PGEJ-FREISETZUNG UND PARIETALZELIGEHALT 44
4.2.1.1. PGEJ-FREISETZUNG IN ZELLFRAKTIONEN VERSCHIEDENEN
PARIETALZELIGEHALTES 44
4.2.2.1. ABHAENGIGKEIT DER BASALEN PGE 2 - FREISETZUNG VON DER
ZEILOBERFLAECHE 45
4.2.2.2. ZUSAMMENHANG ZWISCHEN DER BASALEN FGE 2 - FREISETZUNG UND DEM
PARIETALZELLANTEIL 46
4.2.3. BEEINFLUSSUNG DER BASALEN PGE 2 -FREISETZUNG DURCH HISTAMIN,
FORSKOLIN, DI - BUTYRYL - CFLFLP, CARBACHOL UND PENTAGASTRIN 40
4.2.4. EINFLUSS VON CALCIUM UND CALCIUMANTAGONISTEN AUF DIE BASALE PGE 2
- FREISETZUNG 51
IMAGE 4
4.2.5. EINFLUSS VON IN VIVO STRESSFAKTOREN AUF DIE BASALE
PGEJ-FREISETZUNG 56
4.3. PHARMAKOLOGISCHE BEEINFLUSSUNG DER PGE 2 -FREISETZUNG AUS
ISOLIERTEN TLAGENSCHLEIMHAUTZELLEN DER RATTE 59 4.3.1.
CYCLOOXYGENASEHEMMSTOFFE UND ARACHIDONSAEURE 59 4.3.2, MILDE
MAGENSCHLEIMHAUTREIZSTOFFE 61
4.3.3, CARBENOXOLON 63
4.3.4. ANTAZIDA UND SUCRALFAT 65
5. DISKUSSION ( METHODIK )
5.1. AUSWAHL DES MESSVERFAHRENS ** 68
5.2. GEWINNUNG DES ANTISERUMS FUER DEN RADIOIMMUNOASSAY 68 5.2.1.
KOPPLUNG DES PROSTAGLANDIN E 2 AN RINDERSERUMALBUMIN 68 5.2.2.
IMMUNISIERUNG 69
5.2.3. PRUEFUNG DES ANTISERUMS 70
5.2.4. SPEZIFITAET DES ANTISERUMS 70
5.2.5. ZUVERLAESSIGKEIT 71
5.2.6. NACHWEISGRENZE 72
5.2.7. TRACER 72
5.2.8. TRENNUNGSVERFAHREN 72
5.2.9. EXTRAKTIONSVERFAHREN 73
6. DISKUSSION ( ERGEBNISSE )
6.1. EINFLUSS DER EXPERIMENTELLEN BEDINGUNGEN AUF DIE PGE 2 -
FREISETZUNG IN VITRO AUS ISOLIERTEN MAGENSCHLEIMHAUTZELLEN DER RATTE 74
6.2. PGE 2 - FREISETZUNG UNTER PHYSIOLOGISCHEN ASPEKTEN 75 6.2.1. PGEJ -
FREISETZUNG UND PARIETALZELLGEHALT 75
6.2.2. PGE 2 - FREISETZUNG UND ZELLOBERFLAECHE 76
6.2.3. BEEINFLUSSUNG DER PGE, - FREISETZUNG DURCH HISTAMIN, FORSKOLIN,
DIBUTYRYL - CFIFTP, CARBACHOL UND PENTAGASTRIN 76 6.2.4. PGE 2 -
FREISETZUNG UND CALCIUM 78
6.2.5. EINFLUSS VON STRESSFAKTOREN BEI DER RATTE AUF DIE PGE, - (
FREISETZUNG AUS ISOLIERTEN ZELLEN DER MAGENSCHLEIMHAUT 81 6.3.
PHARMAKOLOGISCHE BEEINFLUSSUNG DER PGE, - FREISETZUNG 82 6.3.1. EINFLUSS
VON CYCLOOXYGENASEHEMMSTOFFEN ( NICHTSTEROIDALE
ANTIRHEUMATIKA ) UND ARACHIDONSAEURE 82
6.3.2. ADAPTATIVE CYTOPROTEKTION 86
6.3.3. CARBENOXOLON 89
6.3.4. ANTAZIDA UND SUCRALFAT 89
IMAGE 5
7. ZUSAMMENFASSUNG UND SCHLUSSFOLGERUNG
7.1. ZUSAMMENFASSUNG 92
7.2. SCHLUSSFOLGERUNG 93
8. LITERATURVERZEICHNIS 94
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